棉花中堿誘導蛋白質(zhì)組學的分析與鑒定.pdf

1、目前土地鹽堿化嚴重，耕地面積隨之大幅減少，為了擴大耕地以應對人口過快增長所帶來的巨大生存壓力，就需要克服鹽堿對經(jīng)濟作物的傷害。而鹽堿土地上對作物最大的危害是堿脅迫。因此揭示耐堿機制，培育耐堿經(jīng)濟作物，擴大可耕種面積成為必然趨勢。而棉花作為重要的經(jīng)濟作物，具有相對較強的耐鹽堿性，因此，通過使用分子生物學的技術和手段研究棉花的耐堿機制，進而用以提高和改造棉花的耐堿性，培育出更優(yōu)質(zhì)的耐鹽堿棉花品種，對于鹽堿土地的利用具有重要的理論和應用價值。

2、
　　本文使用耐鹽堿棉花品種中H177作為材料，通過改良的TCA-丙酮法提取用不同梯度濃度NaHCO3/Na2CO3混合堿液12h、24h處理后的四葉期棉花的葉片總蛋白。經(jīng)過SDS-凝膠電泳，和POD酶活性的檢測試驗，確定處理條件為60 mM NaHCO3/Na2CO3堿液，處理12h。提取棉花總蛋白進行雙向電泳實驗，經(jīng)過研究分析得到其中有7個上調(diào)蛋白和15個下調(diào)蛋白，共22個顯著差異點。這些蛋白與光合作用、防御機制、能量代謝等相

3、關。接著優(yōu)化了處理條件，把處理時間縮短為6 h，蛋白的范圍縮小到四葉期棉花真葉總蛋白，用相同的實驗方法得到29個全上調(diào)顯著差異蛋白，除了有光合作用、防御機制、能量代謝等相關蛋白，還有有機酸類相關蛋白。然后，繼續(xù)尋求其根部的差異蛋白，共鑒定出11個蛋白，其中3個上調(diào)8個下調(diào)，對比發(fā)現(xiàn)得到的差異蛋白種類大大有別于真葉中發(fā)現(xiàn)的蛋白。之后針對6h處理的棉花真葉的29個上調(diào)蛋白中的5個差異度較高的蛋白，對這五個蛋白進行了轉(zhuǎn)錄表達水平的檢測，發(fā)現(xiàn)有