小麥與異屬禾草的體細胞雜交與育種研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文小麥與異屬禾草的體細胞雜交與育種研究姓名：夏光敏申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師：張新時2001.10.15山東大學(xué)博士論文小麥與異屬禾草的體細胞雜交與育種研究中文摘要小麥的體細胞雜交曾一度是世界難題，未能突破雜種植株的再生.本研究在小麥原生質(zhì)體再生植株及培養(yǎng)條件優(yōu)化的基礎(chǔ)上，開展了小麥與異屬植物的體細胞雜交，建立對稱及不對稱融合再生雜種植株的實驗程序，并對雜種的發(fā)育、細胞遺傳及性狀進行了研究，創(chuàng)建了小麥體

2、細胞雜種新種質(zhì)和新品系.初步探索出一條可用于小麥育種的生物技術(shù)新途徑(I要研究過程及實驗結(jié)果如下:1.實驗材料及原生質(zhì)體培養(yǎng)基的優(yōu)化:這是進行小麥體細胞雜交的基礎(chǔ)和必要條件.本實驗建立了由小麥(Triticumasetivum)濟南177(cv.Jinan177)和昌樂5號(cv.ChangleNo.5)小愈傷組織(23mm)和細胞團(0.2lmm)組成的小麥混合型懸浮系，用懸浮系中的小愈傷組織分離原生質(zhì)體顯著提高了再生頻率.比較了基本

3、培養(yǎng)基和附加成分對原生質(zhì)體分裂頻率的影響，篩選出小麥原生質(zhì)體培養(yǎng)所需的附加成分，實現(xiàn)了小麥原生質(zhì)體培養(yǎng)條件的優(yōu)化(第二章)，為進一步的體細胞雜交奠定了基礎(chǔ).2.對稱融合程序的建立:普通小麥濟南177(Triticumaestivum.cv.Jinan177)懸浮細胞來源的原生質(zhì)體經(jīng)不同濃度的碘乙酞胺(IOA)處理后與高冰草(Agropyronelongatum)愈傷組織來源的原生質(zhì)體用PEG法誘導(dǎo)融合，獲首例小麥體細胞雜種再生植株及可育

4、后代.雜種表型偏向高冰草.熒光原位雜交(FISH)分析證明，雜種含有較多的高冰草染色體及較少的小麥染色體，并且有整臂易位發(fā)生雜種后代中小麥染色體穩(wěn)定存在.該實驗建立了PEG法誘導(dǎo)小麥與禾草的原生質(zhì)體融合和融合產(chǎn)物再生雜種植株的程序首次發(fā)現(xiàn)雙親在融合中存在著植株再生互補效應(yīng)克服了小麥原生質(zhì)體及禾草原生質(zhì)體易于喪失胚性，因而難于再生植株的難題為其它組合的小麥體細胞雜交莫定了成功的基礎(chǔ).此實驗還發(fā)現(xiàn):過多的禾草染色體進入雜種細胞及染色體不定向