體細胞雜交創(chuàng)建表達高抗白葉枯病基因的水稻新種質(zhì).pdf

1、通過疣粒野生稻與栽培稻原生質(zhì)體融合研究，試圖通過不對稱融合途徑，實現(xiàn)疣粒野生稻的遺傳物質(zhì)向栽培稻轉(zhuǎn)變，獲得體細胞種間雜種再生植株。1.進行了栽培稻大粒香、疣粒野生稻的愈傷組織誘導和對非胚性愈傷組織的狀態(tài)調(diào)控，使非胚性愈傷組織向著胚性方向轉(zhuǎn)化。2.建立了疣粒野生稻、栽培稻大粒香的胚性懸浮細胞系。不同基因型的愈傷組織在懸浮系建立過程中，對AA培養(yǎng)基的適應(yīng)性不同，在懸浮培養(yǎng)的不同時期，懸浮細胞的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，理想的懸浮細胞系表現(xiàn)為細胞結(jié)構(gòu)松散

2、，細胞質(zhì)濃，顏色微黃，生長迅速。3.4.采用PEG化學融合法獲得了大粒香與疣粒野生稻不對稱體細胞雜交的再生植株共95株融合植株。5.對融合再生植株的形態(tài)進行了觀察，融合植株形態(tài)表現(xiàn)明顯偏向栽培稻，也具有野生稻的特性。葉片長度和生長的形式似野生稻，葉寬介于兩個親本之間。6.對疣粒野生和大粒香的體細胞雜交D3代132份材料進行檢測驗證，已獲得了6份材料高抗白葉枯病的新種質(zhì)(3級以下)，中抗的有27份(4級以下9份，5級以下18份)。7.同時

3、我們將再次檢測的抗性較好的D3代12份材料進行RAPD，PCRAFLP的分子檢測，證明是疣粒野生稻與大粒香的融合雜種。8.采用AFLP、RAPD、毛線管電泳技術(shù)分析體細胞雜交獲得的新種質(zhì)，經(jīng)測序和基因功能分析初步確認來源于疣粒野生稻的遺傳物質(zhì)(DNA片段)分布水稻第2號第4號第6號和第12染色體上。9.將抗性等綜合性狀較好的體細胞雜交材料進行了6代的選育。從F1代選育獲33份；F2代選育獲36份；F3代選育獲124份；F4代選育獲67份