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1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文甜菜夜蛾UAP基因的克隆、時(shí)空表達(dá)及功能的初步研究姓名:陳宏鑫申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):食品安全生物學(xué)指導(dǎo)教師:張文慶20090527中山大學(xué)碩士學(xué)位論文表達(dá),在氣管和中腸中的表達(dá)次之,在馬氏管中表達(dá)微弱,在脂肪體中則基本檢測(cè)不到基醫(yī)轉(zhuǎn)錄本的存在,其主要分布在與幾丁質(zhì)合成有關(guān)的組織中。同時(shí)我們也分別提取了甜菜夜蛾整個(gè)生活周期的總RNA,同樣通過(guò)RTPCR方法分析SeUAP在各個(gè)時(shí)期的表達(dá)情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)SeUAP在甜菜夜
2、生長(zhǎng)發(fā)育的各個(gè)階段都有表達(dá),在卵的整個(gè)階段、L22(幼蟲(chóng)二齡第二天)、L31、L42、L51、P0、P5、P7以及A3這些天中的表達(dá)量較高,其余天數(shù)表達(dá)量較低,其表達(dá)的高峰主要出現(xiàn)在幾丁質(zhì)需求量較高的時(shí)期。通過(guò)向甜菜夜蛾五齡一天的幼蟲(chóng)注射5pldsUAP(1ttg/p1),成功干擾UAP基因的表達(dá),并導(dǎo)致了部分甜菜夜蛾化蛹障礙及死亡,形成畸形蛹。畸形蛹的表型主要包括兩種類型:(1)蟲(chóng)體腹部蛹?xì)ひ鸦拘纬刹⒁延不?,但頭部蛹?xì)ば纬捎姓系K,化
3、蛹時(shí)無(wú)法突破舊表皮;(2)蟲(chóng)體頭部蛹?xì)ば纬烧?,也能正常突破舊表皮,但蛻皮過(guò)程僅到此為止,無(wú)法正常進(jìn)行下去。出現(xiàn)以上畸形的蛹大部分仍然存活,只是無(wú)法完成整個(gè)化蛹過(guò)程。所有處理組的幼蟲(chóng)若成功化蛹,則95%以上的蛹都可以正常發(fā)育至羽化。因此,我們預(yù)測(cè)SeUAP在甜菜夜蛾化蛹過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。同時(shí)我們也利用RTPCR方法成功檢測(cè)到dsUAP的干擾效果,并發(fā)現(xiàn)其對(duì)幾丁質(zhì)合成酶B基因(SeCHSB)的表達(dá)有上調(diào)作用,對(duì)幾丁質(zhì)合成酶A基[璺(
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