耳廓軟骨細胞生物學特性研究及組織工程軟骨的體外構建初探.pdf

1、獲得來源廣泛、具有穩(wěn)定表型和良好增殖能力的種子細胞是體外構建組織工程軟骨并進行關節(jié)軟骨缺損及其他軟骨損傷修復的前提.異體軟骨細胞與自體軟骨細胞、骨膜細胞、骨髓間充質干細胞、胚胎干細胞等相比具有來源廣泛、不給病人帶來額外痛苦等優(yōu)點,而豬的細胞、組織和器官常用于代替人體細胞、組織和器官移植.該研究以關中黑豬為實驗動物,對軟骨細胞分離、培養(yǎng)和鑒定方法及體外擴增的途徑進行了探討,并以所得的軟骨細胞對組織工程軟骨體外構建的技術方法進行了初步嘗試.

2、綜上述試驗結果,得出如下結論:1.采用0.25%胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型膠原酶配合消化的方法能成功地從關中黑豬耳廓軟骨分離出具有活性的軟骨細胞.2.與未完全消化的組織塊共培養(yǎng)可為軟骨細胞的生長提供一個與正常生理條件相似的生長環(huán)境,有利于軟骨細胞經(jīng)多次傳代后的正常增殖和表型維持.3.用BFF替代FBS培養(yǎng)軟骨細胞能較好地促進細胞增殖,并能維持軟骨細胞的表型,以添加10%BFF的培養(yǎng)液促增殖效果最好.4.添加EGF也能提高軟骨細胞的增殖速率,