條斑紫菜藻紅蛋白的提取純化及其穩(wěn)定性研究.pdf

1、該文探討了從條斑紫菜葉狀體中提取純化藻紅蛋白的方法并對藻紅蛋白穩(wěn)定性進(jìn)行了研究和分析.分別采用凍融法、化學(xué)試劑法、溶脹法、低濃度氯化鈣溶液提取法、組織搗碎法、液氮研磨法等多種細(xì)胞破碎方法及組合細(xì)胞破碎方法對條斑紫菜細(xì)胞進(jìn)行破碎,比較提取效果.應(yīng)用層析技術(shù)除鹽進(jìn)而得到高純的藻紅蛋白.采用Sephadex G-25除鹽并使純度提高至2.970.經(jīng)一次羥基磷灰石(HA)柱層析,純度已達(dá)4.545,符合藻紅蛋白純度認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)(4.0).再經(jīng)一次H

2、A柱層析,即可得到高純的R-藻紅蛋白(純度為9.909).兩次HA柱層析后的R-PE在聚丙烯酰胺凝膠電泳時均得到一條帶,表明純度已經(jīng)較高.R-PE的最大吸收峰在565nm,其室溫?zé)晒獍l(fā)射峰為580nm.通過十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE),R-PE可分為α,β兩個亞基,分子量分別為17.0kD和19.0kD.該文得到的條斑紫菜藻紅蛋白提純工藝經(jīng)濟(jì)高效,適合大規(guī)模生產(chǎn).對影響條斑紫菜藻紅蛋白粗提液穩(wěn)定性的諸多因素進(jìn)行

3、了初步研究和探討.采用了可見光、紫外光、紅外光等光源對條斑紫菜藻紅蛋白鹽析液進(jìn)行了不同時間照射,檢測了吸收光譜的變化,并對變性機(jī)制進(jìn)行了探討,結(jié)果表明,不同光源對藻紅蛋白產(chǎn)生不同程度的破壞,照射時間越長,破壞程度越大.同時對影響藻紅蛋白穩(wěn)定性的其它因素也進(jìn)行了研究,結(jié)果表明溫度、pH值對藻紅蛋白的穩(wěn)定性有很大影響,藻紅蛋白在疊氮化鈉溶液中可以保存較長時間.根據(jù)上述研究結(jié)果,藻紅蛋白適宜保存條件為:低溫(5℃左右)、避光、一定pH值范圍(