12491.importin13基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究

1、廈門(mén)大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立完成的研究成果。本人在論文寫(xiě)作中參考其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和《廈門(mén)大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動(dòng)規(guī)范(試行)》。另外，該學(xué)位論文為(溯濤)課題(組)的研究成果，獲得(陶痔)課題(組)經(jīng)費(fèi)或?qū)嶒?yàn)室的資助，在‘隅壽)實(shí)驗(yàn)室完成。(請(qǐng)?jiān)谝陨侠ㄌ?hào)內(nèi)填寫(xiě)課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒?yàn)室名稱，未有此項(xiàng)聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。)聲明人(簽名)

2、：了審矽腳年S月21Et摘要在真核生物中，轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物組分，絕大多數(shù)轉(zhuǎn)錄因子和調(diào)控因子以及細(xì)胞周期調(diào)控蛋白，它們作為參與和保障細(xì)胞正常生命活動(dòng)，發(fā)育和分化所必須的生物大分子，都需要在正確的時(shí)間和空間進(jìn)出細(xì)胞核，而這個(gè)過(guò)程主要是由Importin13家族參與介導(dǎo)完成的。Importin13家族蛋白在核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)中起到了極其重要的作用，因此，Importinp家族蛋白自身的表達(dá)調(diào)控也成為了調(diào)節(jié)核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的一種重要方式。Importin13(IP

3、013)作為這個(gè)家族的成員，也是目前所知的在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中罕見(jiàn)的能夠雙向轉(zhuǎn)運(yùn)底物蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)受體，對(duì)其轉(zhuǎn)錄調(diào)控的研究具有獨(dú)特的意義。為了研究IP013的轉(zhuǎn)錄調(diào)控，在本研究中，我們分析了一些轉(zhuǎn)錄因子與IP013的表達(dá)分布，并利用被廣泛使用的JASPAR數(shù)據(jù)庫(kù)和MAPPER數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)了在IP013啟動(dòng)子上可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。我們構(gòu)建了含IP013(2000一162)和IP013(433一162)的熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒，通過(guò)一系列熒光素酶活性測(cè)

4、定實(shí)驗(yàn)，我們確定了MEF2C能夠與IP013啟動(dòng)子上EBOX元件結(jié)合。隨后，我們使用ChIP實(shí)驗(yàn)和EMSA實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了此結(jié)論。之后我們考慮MEF2C能否促進(jìn)內(nèi)源IP013的表達(dá)。于是在293T細(xì)胞內(nèi)過(guò)表達(dá)了MEF2C，結(jié)果證明MEF2C確實(shí)能夠促進(jìn)IP013的表達(dá)。這為今后研究其他Importinp家族成員的轉(zhuǎn)錄調(diào)控提供了一個(gè)良好的模式，并且為了解IP013是如何參與不同細(xì)胞在不同階段的生命活動(dòng)奠定了良好的基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：Importin1