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1、鑒于轉(zhuǎn)基因大豆這種潛在風(fēng)險(xiǎn),本研究對我國大豆主產(chǎn)區(qū)黑龍江省的田間大豆籽粒和北京市場的大豆制品豆腐進(jìn)行了轉(zhuǎn)基因成分的PCR定性檢測,并對檢測結(jié)果進(jìn)行了分析?! 邶埥」枮I、黑河、佳木斯、雙鴨山、雞西地區(qū)的大豆田進(jìn)行五點(diǎn)取樣,共采集210份檢測樣品。首先對DNA提取做了不同探討,對GMO試劑盒提取法和改良CTAB法提取DNA以及不同部位提取DNA質(zhì)量進(jìn)行了分析比較?! ?yīng)用建立的定性PCR檢測技術(shù)體系對210份大豆樣品進(jìn)行了CaM
2、V35s啟動(dòng)子、Nos終止子、CP4-EPSPS目的基因的轉(zhuǎn)基因成分檢測,同時(shí)對檢測中所出現(xiàn)的不同陽性結(jié)果做了巢式PCR、酶切鑒定和擴(kuò)增產(chǎn)物測序的確證試驗(yàn)。研究表明:所有樣品中均沒有檢測到CaMV35S啟動(dòng)子成分;在Nos引物擴(kuò)增中,0x1樣品出現(xiàn)特異性擴(kuò)增條帶,進(jìn)一步酶切鑒定證明為陽性結(jié)果;有13個(gè)樣品在CP4-EPSPS基因檢測中雖擴(kuò)增出類似陽性對照的條帶,但對PCR產(chǎn)物的進(jìn)一步酶切鑒定表明,所有擴(kuò)增結(jié)果為假陽性。利用巢式PCR對樣
3、品0x1的進(jìn)一步分析表明,0x1樣品中不含有轉(zhuǎn)基因大豆RR成分。對0x1樣品用CP4-EPSPS引物擴(kuò)增得到的片段進(jìn)行測序,序列分析表明,該片段與CP4-EPSPS基因的同源性僅為81%?! 〕闄z了北京市場上的雞蛋豆腐、內(nèi)酯豆腐、蔬菜豆腐、火鍋豆腐等不同類型和不同批次的50份樣品,運(yùn)用所建立的PCR定性檢測體系進(jìn)行了大豆內(nèi)參照基因Lectin、CaMV35s啟動(dòng)子和CP4-EPSPS目的基因的檢測。結(jié)果表明,所抽檢的50份各類豆腐樣品
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