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1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文AP2α通過(guò)增強(qiáng)ERβ表達(dá)抑制大腸癌SW620細(xì)胞惡性增殖與侵襲能力姓名:杜葉平申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:程牛亮20090518山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文后SW620細(xì)胞中ERp基因的表達(dá)情況;進(jìn)一步根據(jù)雌激素受體(ER13)啟動(dòng)子區(qū)域中可能的AP2a結(jié)合位點(diǎn)設(shè)計(jì)1對(duì)寡核苷酸探針,利用EMSA技術(shù)體外水平檢測(cè)各組細(xì)胞的核蛋白與這對(duì)寡核苷酸探針的結(jié)合情況。研究結(jié)果:①轉(zhuǎn)染pcDNA31()
2、一AP2a真核表達(dá)質(zhì)粒后,檢測(cè)到AP一20【基因在大腸癌細(xì)胞株SW620細(xì)胞中獲得高水平表達(dá),并且表達(dá)的AP2a蛋白具有較強(qiáng)的DNA結(jié)合活性;②MTT結(jié)果提示轉(zhuǎn)染AP2a基因后SW620細(xì)胞增殖趨緩;軟瓊脂克隆體積小且數(shù)量少;流式細(xì)胞儀分析發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組靜止期細(xì)胞所占比例增加,DNA合成期所占細(xì)胞比例減少,凋亡率升高;細(xì)胞的黏附、遷移與侵襲生長(zhǎng)能力下降。③EMSA結(jié)果顯示,SW620細(xì)胞中表達(dá)的AP一2a蛋白與ERD寡核苷酸探針發(fā)生特異性結(jié)
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