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1、目的：通過(guò)對(duì)大腸癌LS-174T細(xì)胞在人重組骨橋蛋白(rhOPN)刺激下增殖、侵襲及相關(guān)基因表達(dá)的體外實(shí)驗(yàn)研究，探討骨橋蛋白在大腸癌中的作用。 方法：選擇納摩爾每升數(shù)量級(jí)的不同濃度rh0PN作用于人大腸癌LS-174T細(xì)胞，采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力；重組人工基底膜實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)細(xì)胞侵襲能力；并運(yùn)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR，以甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)作為歸一化的管家基因，采用2-△△CT相對(duì)定量的方法，
2、分析細(xì)胞中尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)、基質(zhì)金屬蛋白酶．2(MMP-2)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vEGF)mRNA表達(dá)的相對(duì)水平。 結(jié)果：1、LS-174T細(xì)胞經(jīng)納摩爾每升數(shù)量級(jí)的不同濃度rhOPN干預(yù)24h后，相對(duì)于未處理組，處理組的MTT值均升高(P＜0．01)，并呈劑量依賴(lài)關(guān)系。2、Transwell上室加入5nmol／L、30nmol／L的rh0PN的后，穿膜的LS—174T細(xì)胞數(shù)均多于對(duì)照組(P＜0．05)，并呈劑量依
3、賴(lài)關(guān)系。3、經(jīng)5nmol／L、30nmol／L的rh0PN處理24h后，LS-174T細(xì)胞的uPAmRNA及VEGFmRNA的表達(dá)升高(P＜0．05，P＜0．01)，而MMP-2mRNA表達(dá)差異無(wú)顯著性。 結(jié)論：rhOPN促進(jìn)人大腸癌LS-174T細(xì)胞的增殖，并提高其侵襲能力。通過(guò)上調(diào)uPAmRNA的表達(dá)可能是rhOPN提高大腸癌LS．174T細(xì)胞的侵襲能力的分子機(jī)制之一，rhOPN上調(diào)LS-174T細(xì)胞VEGFmRNA的表達(dá)，
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