內(nèi)毒素對大鼠腹腔肥大細胞影響的實驗研究.pdf

1、目的:取大鼠腹腔肥大細胞(PMC)進行體外培養(yǎng),探討內(nèi)毒素對大鼠PMC脫顆粒的影響。 方法:取健康雄性Wistar大鼠36只,分離培養(yǎng)大鼠PMC,倒置顯微鏡下觀察細胞的形態(tài)；臺盼藍染色觀察細胞活力；甲苯胺藍染色計算細胞純度。加入不同濃度內(nèi)毒素,將細胞分為5個組：①無LPS處理組：②0.5 μg/m1 LPS處理組；③1 μg/ml LPS處理組；④2 μg/ml LPS處理組；⑤4 μg/ml LPS處理組；置于37℃、5％CO

2、2培養(yǎng)箱培養(yǎng),2h后在倒置顯微鏡下再次觀察細胞的形態(tài)：臺盼藍染色觀察細胞活力；甲苯胺藍染色觀察細胞脫顆粒情況；熒光法測定上清液中組胺水平；專性底物α-N-苯甲酰-DL-精氨酸-P-硝基苯胺(BAPNA)法測定上清液中類胰蛋白酶水平；ELISA法檢測上清液中細胞因子IL-4、IL-10的濃度；放免法檢測上清液中細胞因子TNF-α的濃度。 結(jié)論:經(jīng)LPS處理后大鼠PMC脫顆粒明顯,釋放組胺、類胰蛋白酶及細胞因子IL-4、IL-10、