TACI-Ig對ConA活化淋巴細胞的染色質誘導SLE樣小鼠模型的治療作用.pdf

1、目的:
　　建立刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)活化淋巴細胞的染色質誘導的系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)樣小鼠模型,觀察B淋巴細胞刺激因子受體TACI融合蛋白(TACI-immunoglobulin,TACI-Ig)隔日一次皮下注射給藥8周對模型小鼠的治療作用,并探討其部分作用機制。
　　方法:
　　用ConA活化淋巴細胞的染色質誘導SLE樣小鼠模

2、型,d28起以TACI-Ig(3.75,7.5,15mg·kg-1)隔日一次皮下注射給藥8周,觀察小鼠一般體征變化,目測半定量尿蛋白試紙法檢測動物的尿蛋白變化,HE染色法檢查動物腎臟、脾臟病理改變,計算動物的脾臟和胸腺指數,3H-TdR摻入法檢測脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和ConA誘導的B和T淋巴細胞增殖反應,全自動生化分析儀檢測血清中Crea和BUN水平,酶聯免疫吸附法(enzyme-linked immu

3、nosorbent assay,ELISA)檢測小鼠血清中ANA、anti-dsDNA、IgG1、IgG2a、BLyS、IL-10和IFN-γ水平,流式細胞術檢測脾臟T、B淋巴細胞亞群變化。
　　結果:
　　1.TACI-Ig皮下注射給藥對SLE樣模型小鼠一般體征及尿蛋白的影響
　　模型小鼠在給藥開始后5~8周時被毛疏松,光澤度下降。TACI-Ig皮下注射給藥各組動物在給藥期間行為活潑,毛發(fā)較模型組動物有光澤。

4、　　模型小鼠尿蛋白水平隨著造模后時間的延長而逐漸升高,TACI-Ig(15mg·kg-1)隔日一次皮下注射給藥第4~8周、TACI-Ig(7.5mg·kg-1)隔日一次皮下注射給藥第6~8周均可顯著降低模型動物的尿蛋白水平。
　　2.TACI-Ig皮下注射給藥對SLE樣模型小鼠的腎臟、脾臟組織病理學的影響
　　模型小鼠具有明顯的間質性腎炎特征,腎小球體積增大,系膜細胞增生,系膜基質增多,腎小球玻璃樣變性,局部中性粒細胞浸潤,

5、毛細血管基底膜略增厚;脾臟白髓彌漫性增生,中央動脈管壁纖維性增厚,生發(fā)中心形成。TACI-Ig皮下注射給藥后模型小鼠的腎小球體積減小,腎小球系膜細胞增生減少,腎間質出血、中性粒細胞浸潤等炎癥狀態(tài)有明顯改善。TACI-Ig(7.5,15mg·kg-1)皮下注射給藥能明顯減少脾臟生發(fā)中心的形成,有效改善白髓增生。
　　3.TACI-Ig皮下注射給藥對SLE樣模型小鼠胸腺指數和脾臟指數的影響
　　模型小鼠的脾臟指數較正常小鼠顯著升

6、高,胸腺指數無明顯改變,TACI-Ig(15mg·kg-1)皮下注射給藥可顯著降低SLE樣模型小鼠異常升高的脾臟指數。
　　4.TACI-Ig皮下注射給藥對SLE樣模型小鼠胸腺淋巴細胞和脾淋巴細胞增殖的影響
　　模型小鼠的脾淋巴細胞增殖反應較對照組顯著增強,TACI-Ig(7.5,15mg·kg-1)皮下注射給藥可顯著降低模型小鼠LPS誘導的脾臟B淋巴細胞增殖反應,而對ConA誘導的胸腺T淋巴細胞增殖則無明顯影響。
　

7、　5.TACI-Ig皮下注射給藥對SLE樣模型小鼠腎功能的影響
　　模型小鼠血清Crea和BUN水平比對照組BALB/c小鼠顯著升高,TACI-Ig(7.5,15mg·kg-1)皮下注射給藥能顯著降低模型小鼠的Crea和BUN水平。
　　6.TACI-Ig皮下注射給藥對SLE樣模型小鼠血清ANA、anti-dsDNA、IgG1和IgG2a的影響
　　模型小鼠的血清ANA、anti-dsDNA、IgG1和IgG2a水平顯

8、著升高,TACI-Ig皮下注射給藥對模型小鼠升高的ANA、anti-dsDNA、IgG1和IgG2a水平均有顯著降低作用。
　　7.TACI-Ig皮下注射給藥對SLE樣模型小鼠血清BLyS、IL-10、IFN-γ的影響
　　模型小鼠血清的BLyS、IL-10、IFN-γ水平顯著升高,TACI-Ig(3.75,7.5,15mg·kg-1)皮下注射給藥均可顯著下調BLyS水平,TACI-Ig(15mg·kg-1)皮下注射給藥可顯

9、著降低IL-10水平,TACI-Ig給藥對模型小鼠的IFN-γ水平無明顯影響。
　　8.TACI-Ig皮下注射給藥對SLE樣模型小鼠脾臟T、B淋巴細胞亞群的影響
　　模型小鼠的脾臟總B淋巴細胞(CD19+),活化B淋巴細胞(CD19+CD21+,CD19+CD23+),成熟 B淋巴細胞(CD19+IgD+)的百分比顯著升高,而記憶 B淋巴細胞(CD19+CD27+)和早期B淋巴細胞(CD19+IgM+)的表達與對照組比較差異

10、無顯著性。TACI-Ig(3.75,7.5,15mg·kg-1)皮下注射給藥能顯著降低模型小鼠總B淋巴細胞,活化B淋巴細胞,成熟B淋巴細胞和早期B淋巴細胞的百分比,而對記憶B淋巴細胞表達無明顯影響。模型組小鼠T淋巴細胞各亞群的百分比與對照組無明顯差異。TACI-Ig(15mg·kg-1)皮下注射給藥可以顯著升高活化Th淋巴細胞(CD4+CD25+)百分比,而對Th淋巴細胞其它亞群的表達無明顯影響。
　　結論:
　　1.TAC