脫細(xì)胞異種心臟瓣膜-可降解聚合材料構(gòu)建復(fù)合組織工程瓣膜的初步試驗(yàn)研究.pdf

1、目的：構(gòu)建新型復(fù)合瓣膜，進(jìn)行體外生物力學(xué)測(cè)試和動(dòng)物體內(nèi)移植試驗(yàn)，對(duì)其進(jìn)行初步評(píng)價(jià)，為進(jìn)一步的試驗(yàn)研究提供依據(jù)。 方法：新鮮豬主動(dòng)脈瓣經(jīng)trypsin/EDTA法脫全部細(xì)胞后做為支架，用可降解聚合材料3-羥基丁酸與3-羥基己酸共聚酯(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate，PHBHHx)涂層，構(gòu)建復(fù)合瓣膜(hybrid valve)，進(jìn)行如下試驗(yàn)：(1)采用單軸生物拉伸機(jī)對(duì)hybrid va

2、lve進(jìn)行體外生物力學(xué)測(cè)試，以新鮮豬主動(dòng)脈瓣(fresh valve)和脫細(xì)胞未涂層豬主動(dòng)脈瓣(uncoated valve)做為對(duì)照，觀察脫細(xì)胞和涂層處理對(duì)瓣葉生物力學(xué)相應(yīng)指標(biāo)的影響。(2)以脫細(xì)胞羊肺動(dòng)脈血管片為支架，用PHBHHx涂層，構(gòu)建復(fù)合補(bǔ)片(hybrid patch)并植入New Zealand白兔腹主動(dòng)脈內(nèi)(9只)，進(jìn)行小動(dòng)物血管內(nèi)生物相容性試驗(yàn)，以脫細(xì)胞未涂層羊肺動(dòng)脈血管片(uncoated patch)做為對(duì)照(9只

3、)，在體觀察涂層材料PHBHHx的細(xì)胞相容性、引導(dǎo)性和抗血栓性。(3)體外生物力學(xué)測(cè)試和小動(dòng)物血管內(nèi)相容性試驗(yàn)結(jié)果滿意后，開(kāi)始hybrid valve的大動(dòng)物體內(nèi)移植試驗(yàn)。方法：在全麻常溫非體外循環(huán)下，將hybrid valve帶瓣管道植入成年小尾寒羊的肺動(dòng)脈瓣位(4只)，以脫細(xì)胞未涂層瓣膜(uncoated valve)做為對(duì)照(2只)。術(shù)后18周將受試動(dòng)物處死，取出植入瓣膜進(jìn)行組織學(xué)、免疫熒光染色、掃描電鏡檢查和鈣含量測(cè)定，對(duì)hyb

4、rid valve進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。 結(jié)果：(1)hybrid valve具有自然瓣膜的形態(tài)結(jié)構(gòu)，瓣葉柔軟，體外生物力學(xué)測(cè)試結(jié)果表明，瓣膜抗拉強(qiáng)度明顯提高，有助于增強(qiáng)耐疲勞性。(2)hybrid patch兔血管內(nèi)生物相容性研究表明，hybrid patch形態(tài)滿意，管腔面無(wú)血栓，新生內(nèi)膜增生適度，自體再細(xì)胞化完全，全身炎癥反應(yīng)輕微。(3)hybrid valve羊體內(nèi)移植試驗(yàn)結(jié)果顯示，hybrid valve瓣膜形態(tài)良好，瓣葉柔軟

5、，無(wú)明顯鈣化和血栓形成；掃描電鏡顯示，瓣膜表面光滑；免疫熒光染色檢測(cè)，證實(shí)瓣膜表面新生內(nèi)膜(neointima)組織中類(lèi)內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial-like cells)呈CD31陽(yáng)性反應(yīng)，沿瓣葉表面單層連續(xù)排列，瓣膜間質(zhì)細(xì)胞呈現(xiàn)SMA陽(yáng)性反應(yīng)；鈣含量測(cè)定表明，hybrid valve鈣含量明顯低于uncoated valve(P<0.05)。 結(jié)論：復(fù)合瓣膜(hybrid valve)具有自然瓣膜的三維形態(tài)結(jié)構(gòu)，良好的生