水稻抗白葉枯病新基因的分子標(biāo)記定位.pdf

1、水稻是最重要的糧食作物。由黃單胞桿菌(Xanthomonas oryzae pv．Oryzae，Xoo)引起的水稻白葉枯病是水稻最嚴(yán)重的細(xì)菌性病害，屬于影響水稻產(chǎn)量的三大病害之一。鑒于傳統(tǒng)的化學(xué)防治不僅污染環(huán)境，且效果不佳，生物防治即挖掘和利用抗白葉枯病基因是抵御病菌危害的最佳手段。截至目前，經(jīng)鑒定和報(bào)道的抗性基因(Xa)已達(dá)30個(gè)，其中有6個(gè)已被克隆。但由于致病菌小種分化多，而且不斷變異進(jìn)化，尋找新的高抗廣譜抗白葉枯病基因仍是熱點(diǎn)研究

2、領(lǐng)域。 本研究采用疣粒野生稻與栽培稻大粒香的體細(xì)胞雜交后代Y73作為抗性供體，將其與IR24(國(guó)際水稻研究所IRRI白葉枯病抗性鑒定標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品種)雜交構(gòu)建F2定位群體。利用SSR分子標(biāo)記技術(shù)定位該目的基因，為進(jìn)一步精細(xì)定位及圖位克隆奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下： (1) 通過雜交構(gòu)建了含76個(gè)單株的Y73/IR24 F2群體。經(jīng)剪葉法接種病菌鑒定抗性后，統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)其抗感比為1：3，且F1代表現(xiàn)為感病，故判斷該影響Y73抗性的

3、主效基因?yàn)殡[性基因。 (2) 以Y73/IR24的DNA為PCR模板，經(jīng)SSR-PCR與聚丙烯酰氨凝膠電泳(PAGE)，篩選了400對(duì)SSR引物，其中226對(duì)在親本間的帶型不一致，即表現(xiàn)為多態(tài)性，均勻分布于水稻的12條染色體上。 (3) 從F2群體中分別隨機(jī)取8株表現(xiàn)為抗或感的植株DNA建立抗感池，并利用226對(duì)多態(tài)性SSR引物篩選，獲得了3個(gè)表現(xiàn)為連鎖的標(biāo)記，位于1號(hào)染色體長(zhǎng)臂端的RM6547、RM1339、RM629