羥基喜樹堿抑制視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤HXO-RB-,44-細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)凋亡的研究.pdf

1、目的：研究羥基喜樹堿(HCPT)對體外培養(yǎng)的人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞系HXO-RB<,44>增殖的影響及其誘導(dǎo)HXO-RB<,44>細(xì)胞凋亡的作用，并初步探討其影響細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制。 方法：體外培養(yǎng)HXO-RB<,44>細(xì)胞系，定期傳代換液。各實(shí)驗(yàn)中HCPT均選取10<'-5>，10<'-4>，10<'-3>，10<'-2>，10<'-1>mg/ml五個(gè)藥物濃度，并設(shè)空白對照組。采用MTT法檢測羥基喜樹堿對HXO-RB<

2、,44>細(xì)胞生長的抑制作用。采用流式細(xì)胞儀定量檢測HCPT處理24h后細(xì)胞周期的改變及細(xì)胞凋亡的百分率。采用Western blot免疫印跡技術(shù)檢測HCPT處理24h后細(xì)胞內(nèi)bcl-2蛋白表達(dá)水平的變化。 結(jié)果：羥基喜樹堿在一定濃度范圍內(nèi)(10<'-5>mg/ml，10<'-4> mg/ml，10<'-3>mg/ml，10<'-2>mg/ml，10<'-1>mg/ml)能夠抑制HXO-RB<,44>細(xì)胞的生長，將細(xì)胞周期阻滯在S

3、期，具有時(shí)間、劑量依賴性。流式細(xì)胞儀檢測不同濃度的羥基喜樹堿10<'-5>mg/ml，10<'-4>mg/ml，10<'-3>mg/ml，10<'-2>mg/ml，10<'-1>mg/ml作用24小時(shí)后細(xì)胞凋亡率分別為5.67±1.65％，10.09±1.03％，12.39±0.82％，48.54±1.27％，18.82±0.96％。Dunnett-t檢驗(yàn)均與對照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。Western blot免疫印跡檢測結(jié)