十字花科黑腐病菌中一類與趨化性相關的感受蛋白基因的研究.pdf

1、十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campestris，Xcc)是引起十字花科植物發(fā)生黑腐病的病原菌，該菌同時也是研究微生物與寄主植物相互作用分子機理的重要模式菌，研究該菌的致病機理對于減少農業(yè)經(jīng)濟損失具有重大的意義。目前，細菌的趨化性在病原學方面的意義已經(jīng)被公認。寄主體內含有各種化學物質，因此病原菌的趨利避害顯得尤為重要。根據(jù)Xcc8004基因組的注釋，XC_2307、XC_0286、XC_1074

2、、XC_2313、XC_2504、XC_2304、XC_2316、XC_2320、XC_0336、 XC_2306、 XC_2136、XC_1801、XC_1937、XC_2315、XC_2314、XC_0843、XC_1412、XC_1414、XC_2308、XC_1413、XC_2223、XC_2309、XC_2311、XC_0638這24個基因的編碼產(chǎn)物是趨化蛋白。為了評估這24個基因的功能，本研究利用pK18mobSacB對這些

3、基因分別進行突變，構建了24個基因的缺失突變體，并對這些突變體進行表型分析。
　　植株試驗發(fā)現(xiàn)，與野生型菌株相比較，突變體DM2311基本喪失致病性，DM2223、DM2304、DM1937這三個突變體的致病性降低了大約30％，它們的互補菌能恢復野生型的致病力水平。表明XC_2311、XC_2223、XC_2304、XC_1937與病原菌的致病性相關。對突變體的生長分析發(fā)現(xiàn)，DM2311、DM2223、DM2304以及DM1937

4、這四個突變體在MMX培養(yǎng)基的生長緩慢，它們的互補菌的生長與野生型基本一致，表明XC_2311、XC_2223、XC_2304以及XC_1937與菌體繁殖相關;運動性檢測發(fā)現(xiàn)，DM2311、DM2223、DM2304以及DM1937在含0.3％以及0.6％瓊脂糖游動板的游動性降低，它們的互補菌的游動性與野生型基本一致，表明XC_2311、XC_2223、XC_2304以及XC_1937與菌株的游動性相關;
　　運用毛細管法檢測了Xc

5、c8004對30種化學物質（麥芽糖、葡萄糖、果糖、木糖、乳糖、蔗糖、核糖、阿拉伯糖、甘露醇、酪氨酸、精氨酸、丙氨酸、亮氨酸、絲氨酸、賴氨酸、色氨酸、蘇氨酸、組氨酸、纈氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、異亮氨酸、氯化鎂、氯化鈣、氯化銨、檸檬酸）的趨化性，結果發(fā)現(xiàn)野生型菌株對18種物質（蔗糖、麥芽糖、乳糖、核糖、果糖、半乳糖、木糖、葡萄糖、半胱氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、谷氨酰胺、絲氨酸、異亮氨酸、精氨酸、亮氨酸、氯