聯(lián)合應(yīng)用厄貝沙坦和依達(dá)拉奉對大鼠邊緣性體積供肝移植的供肝保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：通過離體減體積肝葉切除供肝-大鼠原位肝移植方式，探討大鼠邊緣性體積供肝肝移植模型建立的方法，為研究小肝綜合癥的發(fā)病機(jī)制及防治措施提供一個(gè)較為理想的小動(dòng)物模型。②對大鼠邊緣性體積供肝肝移植術(shù)后小體積移植物早期損傷的機(jī)制進(jìn)行初步研究，探討在大鼠邊緣性體積供肝肝移植術(shù)中聯(lián)合使用厄貝沙坦和依達(dá)拉奉，降低再灌注期間門靜脈壓力，減輕缺血再灌注損傷對邊緣性體積供肝早期損傷的保護(hù)作用機(jī)制。③通過在大鼠邊緣性體積供肝肝移植術(shù)中聯(lián)合使用厄貝沙坦和依達(dá)

2、拉奉，降低再灌注期間門靜脈壓力，抗氧化減輕缺血再灌注損傷，減輕小體積移植物早期損傷，初步探討聯(lián)合使用厄貝沙坦和依達(dá)拉奉對大鼠邊緣性體積供肝肝移植術(shù)后小體積供肝再生的影響。 方法：選用健康、9～12周齡、體重190～250g的雄性大鼠192只作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，取周齡相差1～3周，體重相差20～30g的大鼠，以小體重大鼠作為供體，采用離體減體積肝葉切除方式行不同體積供肝的大鼠原位肝移植。②選用健康、體重相差20～30g的雄性SD大鼠30

3、0只，以小體重大鼠為供體，按第一部分介紹的方法建立大鼠邊緣性體積供肝肝移植模型。③分別測定供肝濕重、肝組織免疫組化Ki-67標(biāo)記指數(shù)，了解大鼠邊緣性體積供肝肝臟移植術(shù)后供肝再生的初步情況。 結(jié)果：⑴全肝移植組(A組)7天累積存活率為100％(12/12)，50％部分肝移植組(B組)7天累積存活率為83.3％(10/12)，30％部分肝移植組(C組)7天累積存活率為16.7％(2/12)，小于30％部分肝移植組(D組)均于術(shù)后48

4、小時(shí)內(nèi)死亡。各組間存活率經(jīng)生存分析life-table方法比較，A組與B組累積存活率比較，組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義p=0.148；C組與A組累積存活率比較，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，p<0.001；C組與B組兩組存活率有顯著性差異，p<0.001；C組與D組兩組存活率有顯著性差異，p<0.001；⑵受體在移植前基礎(chǔ)門靜脈壓力各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p>0.05。A組術(shù)中開放門靜脈后1小時(shí)內(nèi)門靜脈壓力穩(wěn)定，B組開放門靜脈后門靜脈壓力雖有小幅上升，

5、但門靜脈壓力仍保持相對穩(wěn)定，而C組和D組開放門靜脈后門靜脈壓力顯著升高，15分鐘達(dá)到峰值，兩組門靜脈壓力峰值分別較基礎(chǔ)門靜脈壓力升高65％和82％。兩組門靜脈壓力30分鐘開始回落，至45分鐘到60分鐘逐漸穩(wěn)定，但仍維持于一高位。將供肝體積的大小與各時(shí)間點(diǎn)的門靜脈壓力進(jìn)行Pearson相關(guān)分析后發(fā)現(xiàn)，供肝體積的大小與基礎(chǔ)門靜脈壓力無相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)r=0.249 p=0.241；而供肝體積大小與開放門靜脈后5、15、30、45、60分鐘門

6、靜脈壓力呈負(fù)相關(guān)性，(相關(guān)系數(shù)分別為r=-0.926，r=-0.936，r=-0.904，r=-0.902,r=-0.867,p<0.05)。⑶肝移植術(shù)后24小時(shí)各組ALT和AST水平明顯升高，四組中以D組水平最高，C組次之，B組和A組最低，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，p<0.001。將供肝體積大小與各組移植術(shù)后24小時(shí)ALT和AST水平進(jìn)行Pearson相關(guān)分析后，結(jié)果顯示供肝體積大小與移植術(shù)后24小時(shí)ALT和AST水平呈負(fù)相關(guān)性，相關(guān)系

7、數(shù)r分別為-0.704和-0.815，p<0.05。⑷光鏡下可見各組均出現(xiàn)不同程度的肝竇充血、局部肝竇擴(kuò)張、血管內(nèi)皮細(xì)胞完整性受損、肝板結(jié)構(gòu)改變及肝細(xì)胞空泡變性等形態(tài)學(xué)異常的表現(xiàn)。與其他組相比較，C，D組在術(shù)后24小時(shí)形態(tài)學(xué)異常的表現(xiàn)均較為明顯且程度嚴(yán)重。⑸電鏡觀察結(jié)果顯示，C，D組在肝移植術(shù)后24小時(shí)出現(xiàn)嚴(yán)重的肝竇內(nèi)皮細(xì)胞線性結(jié)構(gòu)完整性破壞、線粒體腫脹等嚴(yán)重的形態(tài)學(xué)異常。A，B在相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)肝細(xì)胞的超顯微結(jié)構(gòu)保持得相對完整 結(jié)

8、論：①再次證實(shí)直視下離體減體積肝葉切除供肝—大鼠原位肝移植模型是作為為小肝綜合癥基礎(chǔ)性研究的較為理想的小動(dòng)物模型，具有很好的可靠性和可重復(fù)性。②再次證實(shí)了大鼠減體積供肝肝移植模型供肝體積大小的安全界限為50％標(biāo)準(zhǔn)體積；體積介于35～300/0標(biāo)準(zhǔn)體積之間的供肝應(yīng)視為邊緣性體積移植物，小于30％標(biāo)準(zhǔn)體積的供肝可視為超小體積肝移植。③大鼠邊緣性體積供肝肝移植模型的建立，可選取周齡相差1～3周，體重相差20～30克的大鼠，以小體重的大鼠作為供

9、體，除保留肝中葉外，其余四葉均予以切除，可以使供肝濕重與受體肝比值控制在30％～35％之間。④大鼠減體積供肝肝移植模型中，供肝體積大小與開放門靜脈壓力升高幅度及術(shù)后24小時(shí)ALT和AST水平呈負(fù)相關(guān)性，小體積供肝肝移植術(shù)中開放門靜脈后急劇升高的門靜脈壓力對肝竇造成的應(yīng)力性的損傷，是導(dǎo)致肝移植術(shù)后小體積移植物功能損害、受體存活率降低的主要原因。⑤聯(lián)合使用厄貝沙坦和依達(dá)拉奉組對肝細(xì)胞的再生沒有直接的促進(jìn)作用，供肝再生的影響是通過通過降低門靜