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1、【目的】 探討COCl<,2>所致化學(xué)缺氧能否促進(jìn)脂肪組織缺血缺氧耐受相關(guān)基因表達(dá)。按量效關(guān)系和時效關(guān)系分組,篩選最佳的缺氧的模型。為脂肪游離移植進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ),為缺氧預(yù)處理在整形美容外科領(lǐng)域的應(yīng)用提供理論和實驗依據(jù)。 【方法】 選用3月齡SD大鼠72只,隨機分成9組,每組8只。按量效關(guān)系分組,分別分為0 mg/kg組、5 mg/kg組、10 mg/kg組、20 mg/kg組、40 mg/kg組;按時效關(guān)系分
2、組,分別為 1h組、3h組、6h組、12h組、24h組。取相應(yīng)濃度COCl<,2>行大鼠腹股溝皮下注射后按預(yù)定時間切取該區(qū)皮下脂肪,分別行免疫組織化學(xué)法和 RT-PCR 法觀察 HIF-1a 蛋白和 HIF-1a mRNA 的表達(dá)情況。 【結(jié)果】 1.HIF-1a蛋白濃度組:0mg/kg 組:脂肪組織中未見HIF-1a 陽性表達(dá)細(xì)胞。5 mg/kg組:偶見HIF-1a陽性表達(dá)細(xì)胞。10mg/kg、20mg/kg、40mg
3、/kg組HIF-1a陽性表達(dá)細(xì)胞逐漸增多,其中10 mg/kg組與0 mg/kg組比較陽性表達(dá)細(xì)胞細(xì)胞無顯著性差異(P>0.05),20 mg/kg、40 mg/kg組與0 mg/kg組比較陽性表達(dá)細(xì)胞細(xì)胞有顯著性差異(P<0.05),20 mg/kg與40 mg/kg組組間比較陽性表達(dá)細(xì)胞細(xì)胞無顯著性差異(P>0.05)。陽性表達(dá)位于脂肪細(xì)胞細(xì)胞核和部分包膜上。 2.HIF-1a蛋白時間組:20 mg/kg 濃度 COCl<,
4、2>化學(xué)缺氧后1h、3h、6h、12h、24h 均有 HIF-1a 陽性細(xì)胞表達(dá)。3h 組表達(dá)達(dá)高峰,12h、24h 組逐漸下降。3h、6h組和1h組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),12h、24h組和1h組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 3.HIF-1a mRNA 濃度組:濃度組分別為0 mg/kg組可檢測到少量HIF-1amRNA 表達(dá),5 mg/kg、10 mg/kg組 HIF-1a mRNA 表達(dá)出現(xiàn)或升高,20 m
5、g/kg、40 mg/kg組表達(dá)升高顯著,5 mg/kg、10 mg/kg組與0 mg/kg 組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),20 mg/kg、40 mg/kg組與0 mg/kg組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。20 mg/kg組與40 mg/kg組組間比較無顯著性差異(P>0.05)。 4.HIF-1a mRNA時間組:20 mg/kg 濃度CoCl<,2>行化學(xué)缺氧后1h、3h、6h、12h、24h均有 HIF-1a
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