紅菜薹小孢子培養(yǎng)及DH-,1-代的初步研究.pdf

1、紅菜薹(Brassicacampestrisssp.chinensisL.var.utilisTsenetLee.)是原產(chǎn)我國(guó)的特種蔬菜，種質(zhì)資源十分豐富，其品種改良?xì)v來(lái)受到蔬菜育種工作者的重視。紅菜薹的雜交親本的選育目前主要使用常規(guī)方法，雖然成效顯著，但也存在一些不足，比如，育種時(shí)間長(zhǎng)，育成一個(gè)穩(wěn)定優(yōu)良自交系一般需要5-7年，甚至更長(zhǎng)的時(shí)間，從它們中選育自交系尤其費(fèi)事、費(fèi)工。 小孢子培養(yǎng)技術(shù)已成為當(dāng)前國(guó)內(nèi)外植物生物技術(shù)領(lǐng)域中最

2、活躍的研究課題之一。采用該技術(shù)獲得雙單倍體，從中選育可以用作雜交種的親本，純化速度快，純合度高。本實(shí)驗(yàn)對(duì)5個(gè)基因型的紅菜薹進(jìn)行小孢子培養(yǎng)研究，并對(duì)其小孢子第二代株系進(jìn)行了品質(zhì)分析，農(nóng)藝性狀的分析以及自交不親和性的測(cè)定，主要結(jié)果如下： 1.基因型的篩選：對(duì)5個(gè)不同來(lái)源的紅菜薹基因型，進(jìn)行小孢子培養(yǎng)，篩選出2個(gè)較易出胚的基因型，它們是：BJ和SZ；產(chǎn)胚量最高的BJ是產(chǎn)胚量最低的SZ的8.5倍，而其余的三個(gè)基因型都沒有誘導(dǎo)出胚。

3、 2.在培養(yǎng)基中添加0.1mg/ml的活性炭對(duì)紅菜薹小孢子培養(yǎng)的胚胎發(fā)生具有較為明顯的作用，能增加胚狀體的產(chǎn)量。其中活性炭對(duì)BJ的效果最明顯，產(chǎn)胚量平均為2.25個(gè)/蕾，對(duì)照為0.375個(gè)/蕾，處理是對(duì)照的6.33倍；SZ其次，平均0.375個(gè)/蕾，對(duì)照為0.33個(gè)/蕾，處理是對(duì)照的1.13倍，沒有胚狀體產(chǎn)生的基因型未列出。 3.對(duì)花蕾進(jìn)行冷處理影響小孢子的胚胎發(fā)生，以BJ為例，冷處理2天出胚的效果最好，達(dá)到了2.37個(gè)/蕾，

4、冷處理1天、3天、4天的出胚率分別為0.375個(gè)/蕾、0.75個(gè)/蕾、0.234個(gè)/蕾。冷處理5天和不進(jìn)行冷處理沒有胚胎發(fā)生。 4.小孢子的培養(yǎng)密度也對(duì)胚胎發(fā)生有影響，以每ml培養(yǎng)基接種的花蕾數(shù)進(jìn)行比較實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，1.0個(gè)/ml的產(chǎn)胚率最高，達(dá)到了2.88個(gè)/蕾，其次為1.5個(gè)/ml,達(dá)到了2.38個(gè)/蕾，而0.5個(gè)/ml和2.0個(gè)/ml的處理則沒有誘導(dǎo)出胚。 5.對(duì)BJ基因型小孢子DH1代植株Vc含量，蛋白質(zhì)含量，可溶性

5、糖的含量進(jìn)行測(cè)定，通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)后代株系的差異十分顯著，各個(gè)株系之間比較差異也很明顯，說(shuō)明小孢子后代分離很明顯。 6.通過(guò)BJ基因型小孢子DH1代植株的花期和蕾期授粉實(shí)驗(yàn)表明，紅菜薹小孢子植株是典型的自交不親和類型，其自花結(jié)實(shí)率很低，只有極少數(shù)的植株通過(guò)花期授粉獲得了種子。通過(guò)蕾期授粉，發(fā)現(xiàn)植株的親和指數(shù)不高，親和指數(shù)超過(guò)5的植株占群體的40％，最高的為7.17。 7.小孢子DH1代植株的農(nóng)藝性狀進(jìn)行調(diào)查和統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)紅菜薹