花椰菜游離小孢子培養(yǎng)及再生植株研究.pdf

1、以17個花椰菜品種為試材，進行游離小孢子培養(yǎng)，對花椰菜小孢子胚狀體誘導的影響因素、提高小孢子植株獲得率的方法、小孢子植株的繼代培養(yǎng)、生根及移栽技術進行了研究，旨在建立起完善的植株再生體系，研究結果如下。 1.在小孢子胚胎發(fā)生能力方面，不同基因型材料之間成胚能力存在很大差異。在試驗所用的17個基因型花椰菜材料中，有6個獲得了胚狀體，成功率達35.3％。其中魁首(BARKHA)、白馬王子50天產(chǎn)胚量最高，平均每30個花蕾產(chǎn)量分別達1

2、80、169個胚。 2.適合花椰菜小孢子培養(yǎng)的蔗糖濃度為13％，隨著蔗糖濃度的增大，小孢子出胚率呈下降趨勢；適合花椰菜游離小孢子培養(yǎng)的活性碳濃度為500mgL-1，變化趨勢為隨著活性碳的濃度增加，出胚率增加，當活性碳濃度增加到一定的數(shù)值時，出胚率隨著活性碳濃度的增加而下降；培養(yǎng)基添加的AgNO3濃度為60mgL-1時，小孢子的出胚率最高，達到244個/30個花蕾。 3.小孢子發(fā)育程度與花蕾大小的關系因品種而異，魁首(BA

3、RKHA)、白馬王子50天適宜進行小孢子培養(yǎng)的花蕾大小為花蕾長2.7～3.19mm。不同基因型的小孢子發(fā)育同步性差異不大。適合花椰菜游離小孢子培養(yǎng)的小孢子發(fā)育時期為單核靠邊期至雙核早期。 4.在培養(yǎng)基中添加激素可以提高花椰菜小孢子胚的誘導效率。培養(yǎng)基中添加一定濃度的6-BA和NAA，可以很大程度地提高成胚率，適宜濃度為0.05mg.L-1的6-BA和0.1mg.L1的NAA。 5.在4℃下進行0h(對照)及24～120h

4、不同時間冷激處理，采用相同的小孢子分離方法，結果表明低溫處理能提高花椰菜胚狀體的產(chǎn)量，適宜時間為24h，隨著時間的延長，胚產(chǎn)量下降；33℃高溫熱激處理24h，能夠有效地提高花椰菜游離小孢子出胚率，在此條件下泰國耐熱A50天的出胚率達到了87個胚/30個花蕾； 6.胚狀體成苗率與胚胎發(fā)育程度密切相關，胚胎越大越容易成苗。萌發(fā)胚成苗率最高，可達78.12％，子葉胚成苗率可達65.51％；發(fā)育早期的胚胎心形胚和球形胚難以成苗。