2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的: 通過(guò)山羊顳下頜關(guān)節(jié)盤(pán)纖維軟骨細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、鑒定,觀察關(guān)節(jié)盤(pán)纖維軟骨細(xì)胞的分離及體外擴(kuò)增的條件和體外培養(yǎng)的生物學(xué)特性,研究其生物學(xué)特性及組織工程的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ);對(duì)關(guān)節(jié)盤(pán)進(jìn)行分區(qū),定量計(jì)數(shù)各區(qū)中細(xì)胞數(shù)目,表征顥下頜關(guān)節(jié)盤(pán)中細(xì)胞的分型及分布,比較細(xì)胞體外培養(yǎng)后與原組織的差異,為顳下頜關(guān)節(jié)盤(pán)組織工程研究奠定基礎(chǔ)。 方法: 1、無(wú)菌條件下切取1月齡山羊顳下頜關(guān)節(jié)盤(pán),剪碎后用Ⅱ型膠原酶消化14 h,過(guò)濾后獲得關(guān)節(jié)盤(pán)

2、纖維軟骨細(xì)胞。在倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)變化及貼壁率,測(cè)定其生長(zhǎng)曲線,甲苯胺藍(lán)染色、Ⅰ型膠原免疫組化染色鑒定,透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。 2、完整切取山羊雙側(cè)顳下頜關(guān)節(jié)盤(pán),按內(nèi)外側(cè)向及前后向分別等分為三部分和兩部分,將關(guān)節(jié)盤(pán)分為六份。標(biāo)記后用10%中性福爾馬林固定24 h,石蠟包埋后用組織學(xué)、免疫組化及電鏡技術(shù)檢測(cè)山羊顳下頜關(guān)節(jié)盤(pán)。HE染色觀察關(guān)節(jié)盤(pán)各帶細(xì)胞類型及數(shù)目的不同,甲苯胺蘭染色、Ⅰ型膠原免疫組化檢測(cè)膠原的分布,透

3、射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果: 1、原代培養(yǎng)的關(guān)節(jié)盤(pán)纖維軟骨細(xì)胞4 h可觀察到貼壁細(xì)胞,6 h開(kāi)始伸展變形,24h基本全部貼壁,大部分細(xì)胞為圓三角形和多角形,小部分為長(zhǎng)梭形,第7天時(shí)細(xì)胞彼此相連,鋪滿瓶底,細(xì)胞以長(zhǎng)梭形為主,部分多角形。傳代后12h貼壁率達(dá)90%,大部分為多角形,5~6 d即可長(zhǎng)滿瓶底。甲苯胺藍(lán)染色和Ⅰ型膠原免疫組化染色結(jié)果陽(yáng)性。超微結(jié)構(gòu)顯示細(xì)胞內(nèi)線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)。 2、顳下頜關(guān)節(jié)盤(pán)由不均分布

4、的細(xì)胞和膠原纖維組成。膠原幾乎都為Ⅰ型,膠原纖維一般表現(xiàn)為波浪形或卷曲狀,纖維大致平行,而細(xì)胞散在膠原纖維基質(zhì)中。細(xì)胞有成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞和軟骨細(xì)胞樣細(xì)胞兩種,其中前者占優(yōu)勢(shì),兩者比例約為2.05:1。細(xì)胞類型和分布在各區(qū)沒(méi)有顯著性差異。電鏡超微結(jié)構(gòu)顯示成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞核大,梭形或不規(guī)則形,細(xì)胞器很少。軟骨細(xì)胞樣細(xì)胞胞核圓形或橢圓形,周?chē)须娮油干鋮^(qū),細(xì)胞囊不明顯,偽足少見(jiàn)。 結(jié)論: 1、體外分離培養(yǎng)的山羊顳下頜關(guān)節(jié)盤(pán)纖維

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