熊去氧膽酸對大鼠肝移植急性細胞性排斥的影響及在成人肝移植術后早期應用的臨床療效.pdf

1、本研究旨在了解熊去氧膽酸(UDCA)對肝移植術后早期常見并發(fā)癥的影響和機制,并分為以下兩個部分. 一、動物實驗部分 目的：探討UDCA對大鼠肝移植急性細胞性排斥(ACR)的影響及可能的機制 方法：建立可靠的膽汁外引流大鼠肝移植模型并促成術后ACR.20只移植大鼠隨機分為UDCA組和安慰劑對照組.收集術后1～7天膽汁、第7天血清和肝組織.檢測血清ALT、AST、TB、DB、AKP、GGT水平.根據Banff標準病理

2、評估ACR分級.熒光定量PCR檢測肝組織內IL(2、4、6、10)、TNF-α和IFN-γmRNA含量.Westernblot檢測組織內上述細胞因子分子含量.液相色譜一串聯(lián)質譜法(LC-MS/MS)檢測膽汁和血清內非結合型和結合型熊去氧膽酸(UDCA)、鵝去氧膽酸(CDCA)、去氧膽酸(DCA)、膽酸(CA)、石膽酸(LCA)五種膽汁酸。 結果：1.兩組大鼠膽汁日流量均逐日減少,術后第4、5天UDCA組流量明顯高于對照組(P=0

3、.044,0.008),其他時段兩組流量相似. 2.UDCA組輕度.ACR明顯多于對照組(P=0.023),小葉間膽管毀損的例數少于后者(P=0.004). 3.UDCA組第7天血清AST水平明顯低于對照組(P=0.001),但DB水平高于后者(P=0.039),其他生化指標兩組無顯著性差異. 4.第7天采集的肝組織中,UDCA組IL-2 mRNA含量明顯低于對照組(P=0.038),而IL-4分子水平明顯高于后

4、者(P<0.001).其他細胞因子兩組間無顯著性差異. 5.兩組各天膽汁TBA濃度均值相似(P>0.05).術后第2～4天UDCA組膽汁內UDCA 濃度明顯高于對照組(P<0.001,=0.016,<0.001),第2、4、6天膽汁內UDCA比例亦顯著高于對照組(P=0.009,0.001,0.043).第2、4、7天UDCA組膽汁內CA比例明顯低于對照組(P<0.001,=0.005,0.038),兩組各天膽汁內CDCA、DC

5、A、LCA比例相似. 6.第7天兩組血清內TBA、UDCA、CA、CDCA、DCA、LCA濃度相似.UDCA組血清內 UDCA 比例明顯高于對照組(P=0.012),而CA比例低于后者(P=0.009),其他膽汁酸比例兩組相似.UDCA組GUDCA和TUDCA濃度均明顯高于對照組 (P=0.014,0.004),TDCA比例明顯低于對照組(P=0.002),非結合型UDCA比例則顯著高于后者(P<0.001),兩組間GUDCA比

6、例相似. 結論：UDCA可降低大鼠肝移植ACR嚴重程度,表現在降低ACR病理分級和減少小葉間膽管毀損的發(fā)生.抑制肝組織內IL-2 mRNA轉錄及促進IL-4分子合成可能是其作用機制.UDCA.未能改善術后第7天ACR導致的膽汁淤積狀況,但在血清和膽汁內TBA濃度未明顯升高的情況下,無細胞毒性親水性膽汁酸比例明顯上升. 二、臨床研究部分 目的：評估 UDCA 對成人肝移植后早期移植物功能恢復及缺血再灌注損傷(IRI

7、)、ACR、藥物性肝損傷等早期常見并發(fā)癥的影響. 方法：2005年5月～2006年6月80例成人肝移植患者隨機分為UDCA組(42例)和對照組(38例).分析兩組術后第1、7、14、21、28天血清生化指標,及術后1、3個月嚴重IRI致移植物功能異常、ACR、藥物肝毒性、病毒性肝炎、原發(fā)性肝病復發(fā)、膽管和血管并發(fā)癥、感染、死亡發(fā)生率. 結果：術后第7、14、21天UDCA組ALT水平顯著低于對照組(P=0.002,0.0

8、30,0.049),第7天AST、GGT水平亦顯著低于后者(P=0.012,0.025).UDCA組嚴重IRI致移植物功能異常病例明顯少于對照組(P=0.048).兩組術后1、3個月ACR發(fā)生率和病理分級、藥物肝毒性、膽管和血管并發(fā)癥、感染、死亡發(fā)生率相似,無病毒性肝炎或原發(fā)性肝病復發(fā)病例。 結論：UDCA可顯著改善肝移植后早期移植物功能.UDCA對成人肝移植IRI有明顯的治療作用,但對術后早期(3個月)的ACR、藥物肝毒性、膽