不同藥物對內毒素休克大鼠誘導型一氧化氮合酶和內皮素及腎臟細胞凋亡的影響.pdf

1、目的：膿毒癥（Sepsis）是嚴重創(chuàng)（燒、戰(zhàn)）傷、休克、感染、外科大手術患者常見的并發(fā)癥，進一步發(fā)展可導致膿毒癥休克、多器官功能障礙綜合征（MODS），是臨床危重患者的最主要死亡原因之一。最近十多年盡管新的抗生素不斷問世，重癥護理也不斷改進，但膿毒癥的死亡率仍居高不下。隨著對膿毒癥發(fā)生機制的深入了解，認為在膿毒癥休克時，微循環(huán)的改變是影響治療和預后的重要因素，經積極復蘇后盡管體循環(huán)已獲改善，但仍存在微循環(huán)灌注不足，即隱匿性休克。許多動物

2、研究顯示山莨菪堿和前列地爾能改善內毒素休克大鼠的微循環(huán)，發(fā)揮抗休克作用。本研究應用靜脈注射內毒素（LPS）的方法制作內毒素休克大鼠模型進而觀察內毒素休克時腎臟功能的改變及應用改善微循環(huán)的藥物（山莨菪堿和前列地爾）后腎功能有否好轉，并為膿毒癥休克的臨床用藥提供理論依據(jù)。
　　 方法：清潔級健康雌性wistar大鼠50只，體重200-250g（河北醫(yī)科大學實驗動物中心，合格證編號：71043）。隨機分為5組，每組10只。Ⅰ組：對照組

3、；Ⅱ組：內毒素休克模型組；Ⅲ組：去甲腎上腺素干預組；Ⅳ組：前列腺素干預組；Ⅴ組：山莨菪堿干預組。各實驗組按處死大鼠留取標本時間點（1小時和3小時），分為2組，每組5只。每組大鼠均行氣管切開、左側頸動脈置管測壓用及左側股靜脈置管給藥用。本實驗采用左側股靜脈持續(xù)泵入大腸桿菌內毒素（LPS）的方法制作內毒素休克的模型，以平均動脈壓下降30％視為造模成功的標志。給藥方法如下：Ⅰ組：對照組（左股靜脈泵入等量生理鹽水）；Ⅱ組：內毒素休克模型組（L，

4、PS10mg/kg）；Ⅲ組：去甲腎上腺素干預組（LPS10mg/kg+去甲腎上腺素0.1mg/kg.h）；Ⅳ組：前列腺素干預組（LPS10mg/kg+前列腺素50ug/kg.h）；Ⅴ組：山莨菪堿干預組（LPS10mg/kg+山莨菪堿10mg/kg.h）。對照組大鼠置管成功后即留取腎臟及血液標本。膿毒癥模型組大鼠制模成功后1h、3h留取腎臟及血液標本。去甲腎上腺素干預組、山莨菪堿干預組及前列腺素干預組分別于制膜成功后靜脈給予去甲腎上腺素、

5、山莨菪堿及前列腺素，并于1h，3h后留取標本。應用流式細胞儀對腎組織進行凋亡細胞的檢測以確定各實驗組凋亡細胞數(shù)量；留取的血清標本進行內皮素檢測；應用誘導型一氧化氮合酶試劑盒對腎臟標本進行誘導型一氧化氮合酶的檢測。
　　 結果：
　　 1、Ⅱ組（內毒素休克模型組）1h和3h時間段誘導型一氧化氮合酶持續(xù)升高，與Ⅰ組（對照組）相比有顯著性差異（P<0.05）；Ⅳ組（前列地爾干預組）和Ⅴ組（山莨菪菪堿干預組）與Ⅱ組1h和3h兩個

6、時間段相比誘導型一氧化氮合酶水平降低，差別有顯著性（P<0.05）。Ⅲ組（去甲腎上腺素干預組）與Ⅱ組1h和3h兩個時間段相比誘導型一氧化氮合酶水平降低，差別無顯著性（P>0.05）。
　　 2、腎臟凋亡細胞百分比：Ⅱ、Ⅲ組凋亡細胞百分比隨時間延長逐漸升高，與Ⅰ組相比有顯著性差異（P<0.05）；Ⅲ組1h和3h與Ⅱ組1h、3h均無顯著性差異（P>0.05）；Ⅳ組和Ⅴ組第1、3小時凋亡細胞百分比較Ⅱ組和Ⅲ組低，差別有顯著性（P值<0

7、.05）。
　　 3、血清內皮素-1：Ⅱ組1h和3h時間段持續(xù)升高與Ⅰ組相比有顯著性差異（P<0.05）；Ⅳ組和Ⅴ組1h和3h兩個時間段血清內皮素-1與Ⅱ組相比均下降，差別有顯著性（P<0.05）；Ⅳ組與Ⅴ組相比無顯著性差異（P>0.05）。
　　 結論：
　　 1、應用靜脈持續(xù)小劑量輸入LPS的方法可制造出內毒素休克的模型。
　　 2、內毒素休克時血清內皮素水平、腎臟誘導型一氧化氮合酶及腎臟凋亡細胞百分

8、比均明顯升高。
　　 3、山莨菪堿和前列腺素E-1均可降低血清內皮素水平、腎臟誘導型一氧化氮合酶水平及腎臟凋亡細胞百分比。其機制可能是：PGE1能抑制血管平滑肌細胞的游離鈣離子，抑制交感神經末梢釋放去甲腎上腺素，使血管平滑肌舒張，血管擴張，改善微循環(huán)；山莨菪堿可抑制去甲腎上腺素誘導的微血管痙攣和擴張小血管，對抗自由基損傷的作用。
　　 4、去甲腎上腺素不能降低血清內皮素水平和腎臟誘導型一氧化氮合酶以及腎臟凋亡細胞百分比。