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文檔簡介
1、抗生素的濫用或使用不當(dāng)導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性的日益嚴(yán)重是臨床抗感染治療領(lǐng)域域面臨的世界性難題。解決這一問題的方法之一是根據(jù)所感染細(xì)菌的種類及其耐藥性有針對性地使用抗生素。目前對細(xì)菌耐藥性的檢測仍然依賴傳統(tǒng)的藥敏實驗,其最大的缺點是細(xì)菌培養(yǎng)周期長,臨床醫(yī)生無法在感染早期對患者合理用藥。通過PCR技術(shù)直接檢測細(xì)菌耐藥基因,可以快速確定細(xì)菌種類并分析可能具有的耐藥性,為合理使用抗生素提供依據(jù)。銅綠假單胞菌是目前各臨床ICU常見的致病菌,其治療主要依賴
2、β-內(nèi)酰胺類抗生素。銅綠假單胞菌耐受β-內(nèi)酰胺類抗生素主要由細(xì)菌產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶引起。β-內(nèi)酰胺酶種類繁多,其中較為重要的包括AmpC酶、ESBLs等。AmpC酶屬于Bush分類中的Ⅰ類酶或Ambler C類酶,其編碼基因是ampC。不同種屬的細(xì)菌的ampC基因序列顯著不同。 目的:分析南京軍區(qū)南京總醫(yī)院呼吸內(nèi)科ICU病房分離鑒定的銅綠假單胞菌中ampC耐藥結(jié)構(gòu)基因的分布與耐藥狀況的關(guān)系;分析產(chǎn)AmpC酶與與耐藥狀況的關(guān)系;在
3、此基礎(chǔ)上分析ampC耐藥結(jié)構(gòu)基因與產(chǎn)AmpC酶建立起的雙重檢測方法對指導(dǎo)臨床銅綠假單胞菌感染抗生素用藥的意義。 方法: 1、標(biāo)本菌株收集來源于南京軍區(qū)南京總醫(yī)院呼吸科ICU病房2004年2月至2006年2月臨床分離的147株銅綠假單胞菌。 2、用PCR檢測147株銅綠假單胞菌中ampC基因的分布。 3、應(yīng)用頭孢西丁三維實驗的方法檢測細(xì)菌產(chǎn)AmpC酶的狀況。 4、應(yīng)用紙片擴散法鑒定細(xì)菌的耐藥性。
4、 5、運用SPSS16.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析ampC基因的分布以及產(chǎn)AmpC酶的狀況對細(xì)菌耐藥性的影響。 結(jié)果: 1、在147株銅綠假單胞菌中,PCR檢測結(jié)果顯示:有107株ampC基因陽性,陽性率為72.8%:部分PCR陽性產(chǎn)物測序結(jié)果與GeneBank序列(AE004827)一致,同源性為100%。 2、ampC基因陰性菌株依次對亞胺培南、頭孢他啶、頭孢吡肟及頭孢哌酮/舒巴坦敏感,敏感率依次為95.0%、92
5、.5%、90.0%、90.0%;ampC基因陽性菌株依次對亞胺培南、頭孢他啶、頭孢吡肟及頭孢哌酮/舒巴坦敏感,敏感率依次為95.3%、75.7%、74.8%、73.0%。統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果顯示:ampC基因陽性菌株對頭孢他啶、頭孢吡肟及頭孢哌酮/舒巴坦敏感率明顯降低(P<0.05)。 3、147株銅綠假單胞菌中88株產(chǎn)AmpC酶,陽性率為59.9%。另外,40株ampC基因陰性菌株中有3株產(chǎn)AmpC酶,可能以質(zhì)粒介導(dǎo)方式產(chǎn)AmpC酶
6、。 4、不產(chǎn)AmpC酶菌株依次對亞胺培南、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢他啶、頭孢吡肟敏感,敏感率依次為100%、94.9%、93.2%、91.5%;產(chǎn)AmpC酶菌株依次對亞胺培南、頭孢吡肟、頭孢他啶、頭孢哌酮/舒巴坦敏感,敏感率依次為92.0%、81.8%、71.6%、62.5%。統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果顯示:產(chǎn)AmpC酶菌株對亞胺培南、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢他啶、頭孢噻肟、氨曲南及頭孢呋辛敏感率明顯降低(P<0.05)。 5、ampC
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