高劑量放療不同間隔時間的放射生物學基礎研究.pdf

1、目的： 從細胞和裸鼠動物模型水平，研究比較不同時間間隔的相同大劑量X射線對人肺腺癌細胞系Anip973的影響，及其對肺癌細胞凋亡壞死的影響，推測這種放療模式的生物學機理。 方法： 1.培養(yǎng)建立人肺腺癌細胞系Anip973離體細胞系，醫(yī)用加速器6MV-X線行細胞兩次照射，每次照射20Gy，劑量率為400cGy/min，兩次照射間隔時間分別為24h、72h、168h。照射后光鏡、電鏡觀察24h后細胞形態(tài)學變化；流式細

2、胞儀檢測細胞凋亡；Comet分析定量檢測DNA損傷。 2.將培養(yǎng)的人肺腺癌細胞系Anip973接種于裸鼠皮下建立移植瘤模型。至移植瘤平均直徑達10mm左右時隨機分組固定，清醒狀態(tài)下進行不同時間間隔(24h、72h、168h)的兩次照射，每次照射20Gy，劑量率為400cGy/min。照射后繼續(xù)飼養(yǎng)，觀察腫瘤體積變化，繪制腫瘤生長曲線，計算腫瘤生長延緩時間。 結(jié)果： 1、光鏡觀察形態(tài)學改變：與對照組相比，照射后各組

3、Anip973細胞體積增大，出現(xiàn)較明顯的分化。 2、電鏡觀察形態(tài)學改變：與對照組相比，照射后各組Anip973細胞細胞腫脹，細胞膜破裂，囊性細胞器擴張，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒，線粒體腫脹，嵴少而短，呈現(xiàn)典型的細胞凋亡改變，并隨著間隔時間的延長，結(jié)構(gòu)完整的細胞逐漸減少。 3、流式細胞術檢測細胞凋亡：間隔168h組，與間隔24h組和間隔72h組相比，凋亡明顯減少，細胞存活率顯著減低，細胞多以脹亡形式死亡。 4、COMET分

4、析：Anip973細胞尾部DNA百分含量、尾長、尾矩、Olive尾矩等指標，與間隔時間呈現(xiàn)正相關性，隨著間隔時間的延長，尾部DNA百分含量在總的彗星DNA中明顯升高，且DNA片段遷延長度明顯增長。 5、觀察腫瘤生長延緩：照射后各組均表現(xiàn)出良好的生物學效應，動物瘤體表面皮膚反應以濕性反應為主，出現(xiàn)黃色滲液。間隔168h組腫瘤抑制率，生長延緩明顯高于間隔24h組與間隔72h組，24h與72h組間差異無統(tǒng)計學意義。 結(jié)論：