REM睡眠剝奪對(duì)大鼠下丘腦及中腦神經(jīng)肽的影響.pdf

1、目的：研究快眼動(dòng)（Rapid eye movement,REM）睡眠剝奪對(duì)大鼠下丘腦和中腦神經(jīng)肽B(Neuropeptide B,NPB)、神經(jīng)肽W(Neuropeptide W,NPW)及其受體G蛋白耦合受體(G-protein-coupled receptor,GPR)7以及食欲素原(prepro-oxerin)mRN A轉(zhuǎn)錄水平的影響。進(jìn)一步研究REM睡眠剝奪對(duì)下丘腦外側(cè)區(qū)及中縫背核NPB蛋白表達(dá)的影響，探討NPB、NPW以及ox

2、erin在睡眠-覺(jué)醒中的調(diào)節(jié)作用。
　　方法：SD雄性大鼠40只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(cage control，CC)、REM睡眠剝奪(REM sleep deprivation，RD)1天、3天及5天組。每組10只。采用改良多平臺(tái)睡眠剝奪裝置（MMPM）制造睡眠剝奪模型，實(shí)時(shí)熒光定量PCR（real-time PCR,RT-qPCR）檢測(cè)正常睡眠和不同時(shí)間 REM睡眠剝奪后大鼠下丘腦和中腦NPB、NPW及其受體GPR7和prep

3、ro-oxerin mRNA的轉(zhuǎn)錄情況，免疫熒光測(cè)定大鼠下丘腦外側(cè)區(qū)、中腦中縫核處NPB蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:1.REM睡眠剝奪對(duì)大鼠下丘腦及中腦NPB、NPW及其受體 GPR7以及prepro-oxerin mRNA轉(zhuǎn)錄水平的影響。
　?。?）在下丘腦，相對(duì)于CC組，prepro-oxerin mRNA在RD1d、RD3d組轉(zhuǎn)錄水平增加(P<0.01)，GPR7 mRNA的轉(zhuǎn)錄水平下降(P<0.01)，等到RD5d pr

4、epro-oxerin mRNA的轉(zhuǎn)錄水平下降接近CC組時(shí)，NPB mRNA及GPR7 mRNA轉(zhuǎn)錄水平開(kāi)始增加(P<0.01)。本實(shí)驗(yàn)并未發(fā)現(xiàn)RD對(duì)NPW mRNA轉(zhuǎn)錄水平有明顯影響。（2）在中腦，NPB及NPW mRNA在RD3d和RD5d組較于CC組轉(zhuǎn)錄水平明顯下降(P<0.01)，但RD1d組和CC組之間無(wú)明顯差異(P>0.05)。GPR7 mRNA在 RD5d組與 CC相比轉(zhuǎn)錄水平明顯降低(P<0.01)，而在RD1d、RD3

5、d組與CC組相比無(wú)明顯差異(P>0.05)。prepro-orexin mRNA在RD1d、RD3d組較于CC組轉(zhuǎn)錄水平明顯增高(P<0.01)，在RD5d組轉(zhuǎn)錄水平下降，但仍高于CC組(P<0.01)。
　　2.REM睡眠剝奪對(duì)大鼠下丘腦外側(cè)區(qū)及中縫背核NPB蛋白表達(dá)的影響
　　下丘腦外側(cè)區(qū)（LH），NPB免疫陽(yáng)性細(xì)胞在 RD1d和 RD3d組與CC組相比沒(méi)有明顯增多(P>0.05)，在 RD5d組增多明顯(P<0.01)

6、。在中縫背核（DR），與CC組相比，RD1d、RD3d及RD5d組NPB免疫陽(yáng)性細(xì)胞均明顯增多(P<0.01)，且呈上升趨勢(shì)。
　　3.NPB免疫陽(yáng)性細(xì)胞在腦組織中的分布
　　NPB免疫陽(yáng)性細(xì)胞不僅存在于下丘腦腹內(nèi)側(cè)核、背內(nèi)側(cè)核、弓狀核、視交叉上核和未定帶腹側(cè)區(qū)及中腦的腹側(cè)被蓋區(qū)，中縫背核，黑質(zhì)等區(qū)域。還見(jiàn)于基底前腦的VDB(vertical diagonal band,VDB)和HDB(horizontal diagona