AMPK基因在2型糖尿病發(fā)病中的作用.pdf

1、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是一種調(diào)節(jié)細胞能量供應的代謝酶,也被稱為“能量感受器”。為研究AMPK基因對血糖血脂代謝及相關作用機制的影響,探討AMPK基因在2型糖尿病發(fā)病中的作用,我們分別取3-5周齡AMPK轉基因小鼠(AMPK-TG),AMPK基因敲除小鼠(AMPK-KO)和野生型對照(wild type,WT)C57BL/6J小鼠各24只,分為正常飼料(ND)喂養(yǎng)和高糖高脂飼料(HFD)喂養(yǎng)組,每兩周測定小鼠隨機血糖和禁食4小時血

2、糖(4hBG),每4周測定小鼠腹腔注射糖耐量實驗(IPGTT),喂養(yǎng)12周后,解剖取樣,檢測樣本血生化指標,以及與糖脂代謝相關的酶活性和相關的信號蛋白表達。
　　 隨機血糖、空腹4小時血糖和糖耐量測定實驗結果顯示,正常飼料(ND)和高糖高脂飼料(HFD)喂養(yǎng),AMPK-KO小鼠的血糖值總體趨勢都高于WT小鼠(P<0.05),尤其HFD喂養(yǎng)更為明顯；AMPK-TG小鼠的血糖值總體趨勢都低于WT小鼠(P<0.05)。血生化檢測指標顯

3、示,正常飼料喂養(yǎng)情況下,AMPK-KO小鼠的血糖含量、甘油三酯(TG)、總膽固醇(CHO1)含量、低密度脂蛋白(LDL)含量、糖化血清蛋白(GSP)、糖化血紅蛋白(HbAlc)含量明顯高于對照組,高密度脂蛋白含量(HDL)、胰島素、C肽含量均低于對照小鼠(P<0.05)。AMPK-TG小鼠血糖含量、高密度脂蛋白(HDL)含量均低于WT對照組(P<0.05)；甘油三酯(TG)、糖化血紅蛋白(HbAlc)、C肽含量高于WT對照組(P<0.0

4、5)。高糖高脂飼料喂養(yǎng)后,模型小鼠和對照組小鼠血生化指標進一步升高或降低,差異加大。
　　 酶活性實驗結果顯示,正常飼料喂養(yǎng)情況下,AMPK-KO小鼠的糖原合成酶激酶(GsK)活性明顯高于WT對照組(P<0.05)；其肝糖原、肌糖原含量,肝脂酶(HL)、脂蛋白脂酶(LPL)、總脂酶活性,6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G-6-PD)活性和葡萄糖激酶(GK)活性低于對照組(P<0.05)。AMPK-TG小鼠肝糖原含量、脂蛋白脂酶(LPL)、

5、總脂酶活性和葡萄糖激酶(GK)活性高于WT對照組(P<0.05)；6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G-6-PD)、糖原合成酶激酶(GsK)活性低于對照組(P<0.05)。高糖高脂飼料喂養(yǎng)后,模型小鼠和對照組小鼠酶活性指標進一步升高或降低,差異加大。
　　 蛋白表達結果顯示,AMPK-KO小鼠肝臟PPARγ蛋白表達量明顯高于對照組(P<0.05),肝組織P-AMPK蛋白、GLUT-4蛋白的表達量低于對照組(P<0.05)。
　　 以