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文檔簡介
1、目的:
通過對目前國際熱點的植物DNA條形碼候選序列(ITS2、psbA-trnH、rbcL和matK)進行比較和評價,試圖篩選出適合唇形科、百合科、蕓香科、薔薇科和菊科藥用植物鑒定的DNA條形碼序列。
方法:
以廣州中醫(yī)藥大學(xué)藥王山嶺南常用中草藥為材料,利用試劑盒法提取唇形科、百合科、蕓香科、薔薇科和菊科共76種藥用植物的基因組DNA,使用ITS2、psbA-trnH、rbcL和matK序列的通用引物進行
2、PCR和雙向測序,通過比較各序列的擴增和測序成功率、種內(nèi)和種間的差異以及系統(tǒng)發(fā)育樹等指標來評價不同候選序列的鑒定能力。
結(jié)果:
對唇形科20個種60個樣本的分析發(fā)現(xiàn),ITS2、psbA-trnH、rbcL、matK四個候選序列的擴增和測序成功率均為100%。ITS2序列的變異位點數(shù)最多(69.3%),在系統(tǒng)發(fā)育樹方面,ITS2的鑒定成功率為70%、psbA-tmH的鑒定成功率為55%、rbcL的鑒定成功率為45%、m
3、atK的鑒定成功率為75%。
對百合科16個種45個樣本的分析發(fā)現(xiàn),ITS2、psbA-trnH、rbcL、matK四個候選序列的擴增和測序成功率均為100%。ITS2序列的變異位點數(shù)最多(89.1%),在系統(tǒng)發(fā)育樹方面,ITS2的鑒定成功率為87.5%、psbA-trnH的鑒定成功率為62.5%、rbcL的鑒定成功率為68.8%、matK的鑒定成功率為68.8%。
對蕓香科16個種32個樣本的分析發(fā)現(xiàn),ITS2、p
4、sbA-trnH、rbcL、matK四個候選序列的擴增和測序成功率均為100%。psbA-trnH序列的變異位點數(shù)最多(64.7%),在系統(tǒng)發(fā)育樹方面,ITS2的鑒定成功率為81.3%、psbA-trnH的鑒定成功率為81.3%、rbcL的鑒定成功率為68.8%、matK的鑒定成功率為75%。
對薔薇科11個種28個樣本的分析發(fā)現(xiàn),ITS2、psbA-trnH、rbcL、matK四個候選序列的擴增和測序成功率均為100%。ma
5、tK序列的變異位點數(shù)最多(59.5%),在系統(tǒng)發(fā)育樹方面,ITS2的鑒定成功率為100%、psbA-trnH的鑒定成功率為81.8%、rbcL的鑒定成功率為63.6%、matK的鑒定成功率為81.8%。
對菊科13個種39個樣本的分析發(fā)現(xiàn),ITS2、psbA-trnH、rbcL、matK四個候選序列的擴增和測序成功率均為100%。ITS2序列的變異位點數(shù)最多(71.7%),在系統(tǒng)發(fā)育樹方面,ITS2的鑒定成功率為100%、ps
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