大鼠胰島β細(xì)胞衰老及其胰島素分泌功能的研究.pdf

1、目的:2型糖尿病(T2 DM)是常見病,近些年來,隨著生活水平的提高,其患病人數(shù)迅速增加,已成為嚴(yán)重威脅人類健康的世界性公共衛(wèi)生問題。T2 DM的發(fā)病機(jī)制至今尚未明了,深入研究T2 DM的發(fā)病機(jī)制,將有利于T2 DM的預(yù)防和治療,從而使整個(gè)人類受益。目前研究顯示,T2 DM是環(huán)境因素與遺傳共同作用所引起的,環(huán)境因素(飲食結(jié)構(gòu)及衰老)可能起主要作用。流行病學(xué)調(diào)查表明,隨年齡增長(zhǎng),糖耐量下降,T2 DM患病率升高;然而,這一趨勢(shì)的機(jī)制目前仍

2、未完全清楚。另外,足夠的證據(jù)證實(shí),T2 DM患者普遍存在β細(xì)胞數(shù)量和胰島素分泌功能缺陷,在非 DM老年人中,也存在胰島素分泌受損。這些資料提示T2 DM似乎與機(jī)體的衰老有關(guān)。細(xì)胞衰老是機(jī)體衰老的前體,因此,我們提出假設(shè):β細(xì)胞衰老可能參與T2 DM的發(fā)病。本研究旨在研究増齡或限制能量攝入(CR)對(duì)胰島細(xì)胞衰老及胰島素分泌的影響。
　　方法:
　?、?8個(gè)月SD大鼠予限制能量攝入(給予正常飲食量60％)6個(gè)月以建立CR動(dòng)物模型

3、。
　?、诓煌慢g(新生、1個(gè)月、6個(gè)月、24個(gè)月)及CR組(每組各10只) SD大鼠處死,取胰腺。
　　③免疫組化檢測(cè)胰島素及細(xì)胞衰老分子標(biāo)志 p16在各組大鼠胰島的表達(dá)。
　?、堞?gal染色檢測(cè)細(xì)胞衰老標(biāo)志β-半乳糖苷酶在各組大鼠胰島的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　?、匐S年齡增長(zhǎng),胰島內(nèi)p16表達(dá)(胰島內(nèi)p16免疫組化染色陽性細(xì)胞數(shù)/每個(gè)胰島有核細(xì)胞總數(shù))增加。新生組大鼠胰島內(nèi)p16未見表達(dá),p16在其它各年

4、齡組大鼠胰島的表達(dá)為1月組0.00267±0.01534 vs.6月組0.05290±0.01787 vs.24月組0.24526±0.03191)(P<0.01);β-Gal染色陽性(陽性率、著色面積、著色深淺程度)增加也與增齡相關(guān),新生組大鼠胰島β-Gal染色均為陰性,其它各組陽性率為1月組2% vs.6月組15% vs.24月組100%(P<0.01),著色面積為1月組0.04 vs.6月組0.218 vs.24月組2.118,著

5、色程度為1月組0.04 vs.6月組0.18 vs.24月組2.412。
　?、趶男律M大鼠到6個(gè)月組大鼠,隨年齡增加,胰島內(nèi)胰島素表達(dá)逐漸增加(新生組165.1±31.3 vs.1月組206.5±29.8 vs.6月組239.0±32.8)(P<0.05);24個(gè)月與6個(gè)月大鼠相比較,胰島內(nèi)胰島素表達(dá)減少(187.8±26.0 vs.239.0±32.8)(P<0.01)。
　　③ CR組與同齡對(duì)照組相比,胰島內(nèi)p16表達(dá)

6、減少(0.19130±0.02852 vs.0.24526±0.03191)(P<0.01)。CR組與同齡對(duì)照組相比,胰島內(nèi)β-Gal染色陽性(陽性率、著色面積、著色深淺程度)減少,CR組陽性率為84%,而同齡對(duì)照組為100%(P<0.01);CR組著色面積為1.672,而同齡對(duì)照組為2.118;CR組著色程度為1.725,而同齡對(duì)照組為2.412。
　?、?CR組與同齡對(duì)照組相比,胰島素表達(dá)增加(201.7±35.3 vs.18