胚胎干細(xì)胞疫苗和肝臟干細(xì)胞疫苗對預(yù)防和治療小鼠皮下肝癌移植瘤的對比研究.pdf

1、背景和目的:腫瘤與胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞之間存在共同的抗原或細(xì)胞表面分子，因此利用胚胎干細(xì)胞或成體干細(xì)胞疫苗進(jìn)行接種，將激活免疫系統(tǒng)產(chǎn)生針對該共同抗原的適應(yīng)性免疫應(yīng)答效應(yīng)，進(jìn)而通過“交叉反應(yīng)”識別和殺傷腫瘤細(xì)胞甚至腫瘤干細(xì)胞。本研究旨在觀察和比較胚胎干細(xì)胞疫苗與肝臟干細(xì)胞疫苗在預(yù)防和治療小鼠皮下肝癌移植瘤中的作用。
　　方法：1、將10-14周齡的C57BL/6J小鼠分成5組（10只/組），胚胎干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組1和肝臟干細(xì)胞疫

2、苗預(yù)防接種組1分別予每周接種1次，共3次胚胎干細(xì)胞疫苗和肝臟干細(xì)胞疫苗，并于間隔1周后皮下植入活肝癌細(xì)胞株；對照組無接種疫苗，予皮下植入相同劑量的活肝癌細(xì)胞株。為進(jìn)一步比較兩種疫苗預(yù)防肝癌的時(shí)效性，胚胎干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組2和肝臟干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組2分別在完成以上3次疫苗接種程序后，于間隔4周的時(shí)間皮下植入活肝癌細(xì)胞株。2、將年齡、性別和腫瘤初負(fù)荷相當(dāng)?shù)母伟┬∈竽Ｐ头殖?組（5只/組），胚胎干細(xì)胞疫苗治療組和肝臟干細(xì)胞疫苗治療組分別予

3、每周1次，共接受3次胚胎干細(xì)胞疫苗和肝臟干細(xì)胞疫苗治療；對照組無接受任何治療。分別觀察和比較預(yù)防組、對照組、治療組腫瘤的發(fā)生率、生長速度、腫瘤體積等。研究終點(diǎn)設(shè)為：任意腫瘤直徑≥15mm，或開始出現(xiàn)腫瘤潰瘍時(shí)處死所有小鼠，稱量并比較各組腫瘤的質(zhì)量。
　　結(jié)果：1、胚胎干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組1和肝臟干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組1的成瘤率分別為1/10和0/10，均顯著低于對照組的成瘤率6/10（P<0.05），且胚胎干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組1和肝

4、臟干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組1的小鼠皮下腫瘤平均生長速度均顯著低于對照組（P<0.05）。進(jìn)一步觀察兩種疫苗較長期（4周內(nèi)）的預(yù)防作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，胚胎干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組2的成瘤率（2/10）和皮下腫瘤平均生長速度均低于對照組，但統(tǒng)計(jì)學(xué)差異不顯著（P>0.05）；而肝臟干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組2的成瘤率（1/10）和皮下腫瘤平均生長速度均明顯低于對照組（P<0.05）。選擇在實(shí)驗(yàn)開始后第31天處死所有的小鼠，稱量并比較各組腫瘤的平均質(zhì)量，結(jié)果顯示

5、：肝臟干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組1，肝臟干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組2，胚胎干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組1，胚胎干細(xì)胞疫苗預(yù)防接種組2，對照組腫瘤的平均質(zhì)量分別為0.0000克，0.0005克，0.0071克，0.0413克，0.1122克。2、進(jìn)一步研究胚胎干細(xì)胞疫苗和肝臟干細(xì)胞疫苗對治療成瘤小鼠皮下肝癌的作用，結(jié)果顯示，胚胎干細(xì)胞疫苗治療組和肝臟干細(xì)胞疫苗治療組皮下腫瘤的平均生長速度均顯著低于對照組（P<0.05）。其中，2/5荷瘤小鼠經(jīng)胚胎干細(xì)胞疫苗治

6、療后腫瘤病灶穩(wěn)定無進(jìn)展（即治療后腫瘤負(fù)荷較治療前下降不足50％或增加不足25%），4/5小鼠經(jīng)肝臟干細(xì)胞疫苗治療后腫瘤病灶完全消失，所有對照組小鼠的腫瘤病灶均出現(xiàn)進(jìn)展（即觀察終點(diǎn)的腫瘤負(fù)荷較基線水平增加25%以上）。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死所有小鼠，測量各組小鼠皮下腫瘤平均質(zhì)量分別為肝臟干細(xì)胞疫苗治療組0.0190克，胚胎干細(xì)胞疫苗治療組0.0577克，對照組0.2085克。
　　結(jié)論：1、胚胎干細(xì)胞疫苗和肝臟干細(xì)胞疫苗在1周內(nèi)能有效地預(yù)防