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文檔簡介
1、目的:篩選前腦中參與急性癲癇發(fā)作和迷走神經(jīng)刺激抑癲的相關(guān)核團(tuán),觀察其內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞(astrocyte,AS)的分布和形態(tài)變化及其與神經(jīng)元的關(guān)系,探討AS在癲癇發(fā)作和迷走神經(jīng)刺激抑癲中的作用機(jī)制,為癲癇的臨床治療提供理論基礎(chǔ)。 材料和方法:腹腔注射海人酸(kainaticacid,KA)和頸迷走神經(jīng)干刺激術(shù)(VNS)制備動物模型。Fos免疫組化染色法,計數(shù)陽性細(xì)胞數(shù),篩選前腦內(nèi)癲癇發(fā)作敏感區(qū)域和參與迷走神經(jīng)刺激抑癲的相關(guān)核團(tuán);G
2、FAP免疫組化染色觀察AS在上述核團(tuán)內(nèi)表達(dá)和形態(tài)變化;Fos/GFAP免疫組化雙重染色法觀察上述核團(tuán)內(nèi)Fos陽性細(xì)胞與GFAP陽性細(xì)胞的共存關(guān)系;透射電鏡下觀察迷走神經(jīng)刺激對Pv、Pa內(nèi)AS超微結(jié)構(gòu)的影響。 結(jié)果:1.KA組癲癇發(fā)作,Racine分級達(dá)Ⅳ-Ⅴ級;VNS治療組癲癇發(fā)作強(qiáng)度較KA組減弱,Racine分級達(dá)Ⅲ級;對照組、VNS組無癲癇發(fā)作。 2.Fos陽性細(xì)胞數(shù):前梨狀皮質(zhì)、杏仁體、Pa、Pv:KA組和VNS組
3、均高于對照組;VNS治療組低于KA組。海馬:VNS治療組低于KA組;VNS組與對照組未見表達(dá)。齒狀回:VNS治療組與KA組無明顯差異;VNS組與對照組未見表達(dá)。 3.GFAP陽性細(xì)胞分布:前梨狀皮質(zhì)、齒狀回、Pv:KA組和VNS組均高于對照組;VNS治療組低于KA組。海馬,杏仁體:KA組高于對照組;VNS治療組低于KA組;VNS組與對照組無差異。Pa:VNS組高于對照組;KA組與對照組無明顯差異;VNS治療組高于KA組。
4、 4.雙標(biāo)染色顯示Fos和GFAP有共存關(guān)系 1)海馬、齒狀回內(nèi)Fos/GFAP雙標(biāo)細(xì)胞數(shù):VNS治療組低于KA組。Fos單標(biāo)細(xì)胞數(shù):海馬VNS治療組低于KA組;齒狀回VNS治療組與KA組無明顯差異。 2)前梨狀皮質(zhì)、杏仁體內(nèi)Fos/GFAP雙標(biāo)細(xì)胞數(shù):KA組和VNS組高于對照組;VNS治療組低于KA組;Fos單標(biāo)細(xì)胞數(shù):KA組高于對照組;VNS治療組低于KA組;VNS組與對照組無明顯差異。 3)Pv內(nèi)Fos單標(biāo)
5、細(xì)胞數(shù)、Fos/GFAP雙標(biāo)細(xì)胞數(shù):KA組和VNS組高于對照組;VNS治療組低于KA組。 4)Pa內(nèi)Fos/GFAP雙標(biāo)細(xì)胞數(shù):未見。Fos單標(biāo)細(xì)胞數(shù):KA組和VNS組均高于對照組;VNS治療組低于KA組。 5.VNS后Pa,Pv內(nèi)AS細(xì)胞器的超微結(jié)構(gòu)無明顯變化。VNS后Pa內(nèi)在神經(jīng)元和AS胞體交界處可見亮度增高的致密體。 結(jié)論:1)前腦的海馬是癲癇發(fā)作敏感區(qū)域;前梨狀皮質(zhì)、杏仁體、齒狀回、Pv、Pa既是癲癇發(fā)作
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