不同波長光對體外培養(yǎng)人視網膜色素上皮細胞的影響.pdf

1、目的：長時間暴露于強光下可引起視網膜光損傷，尤其是其中藍光部分。這種光化學損傷可累及光感受器細胞和視網膜的色素上皮細胞(RPE細胞)。以往的研究多著重于對光感受器細胞的研究，而視網膜色素上皮細胞對維持正常光感受器細胞的形態(tài)、功能具有重要作用。本文即從此入手，研究不同波長光照射對視網膜色素上皮細胞形態(tài)、功能影響，試從細胞生物學水平探討視網膜光損傷的發(fā)病機制。 方法：酶消化法分離培養(yǎng)人RPE細胞，通過生長曲線的繪制、形態(tài)學和免疫學鑒

2、定、透射電鏡檢查等方法分析RPE細胞的生物學特性；將人RPE細胞置于不同波長光線下培養(yǎng)，通過MTT法、透射電鏡檢查等研究不同波長光對人RPE細胞體外生長特性的影響。 結果： 第一部分： 1、人RPE細胞的培養(yǎng)和生長曲線：體外培養(yǎng)的人RPE細胞接種2小時后細胞開始貼壁生長，3天后細胞伸展，10天融合，傳代細胞在3天左右融合。RPE細胞的生長曲線近“S”形，在傳代后第一天細胞數略減少，經過2-3天的潛伏期后進入對數生

3、長期，7天后達到生長穩(wěn)定的平臺期。 2、體外培養(yǎng)人的RPE細胞透射電鏡：超微結構仍保持正常，細胞核呈橢圓形，核染色質均勻，較密集，胞漿細胞器豐富，有豐富的游離核糖體，線粒體、高爾基復合體、粗面內質網，色素含量很少，縱切面尚可見細胞頂端微絨毛、基底膜內褶及細胞間連接復合體(可能為緊密連接、橋粒、中間連接)等結構。 3、免疫學鑒定：免疫組織化學染色觀察傳代培養(yǎng)3-5代的人RPE細胞胞漿內表達細胞角蛋白(AE1/AE3)。

4、 第二部分： 1、不同波長光對RPE細胞活性的影響：各種光照均使RPE細胞生長變慢，其中，藍光下培養(yǎng)的細胞生長最慢(P<0.05)，依次為紅光、白光，但二者之間差異不明顯(P>0.05)，對照組增生最明顯(P<0.05)(F=12.579，P<0.05)。 2、電鏡結果顯示：紅光、白光組人RPE細胞與對照組相比超微結構無明顯變化，胞漿內各種細胞器數目較多，結構正常，細胞核圓形，核染色質均勻。但藍光組與其它各組比較有