幾種地衣及其附生真菌次生代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、地衣是真菌與藻類(lèi)共生組成的生命體，分類(lèi)學(xué)上由其共生菌-地衣型真菌命名。地衣是一種寬生態(tài)幅生物，可適應(yīng)多種極端生境。地衣體中次生代謝產(chǎn)物種類(lèi)豐富，大部分為地衣所特有，具有多種生物活性。地衣附生真菌是指生長(zhǎng)于地衣菌絲體內(nèi)的真菌，也稱(chēng)地衣內(nèi)生真菌。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)地衣內(nèi)生真菌同樣具有豐富的活性次生代謝產(chǎn)物。
　　本論文對(duì)地衣及地衣內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行了初步研究。首先對(duì)比了刮皮層法與YAMAMOTO法兩種地衣內(nèi)生真菌分離方法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表

2、明前者產(chǎn)率優(yōu)于后者，可用于大規(guī)模地衣內(nèi)生真菌分離。初步摸索了地衣內(nèi)生真菌的發(fā)酵培養(yǎng)條件。對(duì)分離到的一株地衣內(nèi)生真菌 ENF-4進(jìn)行了擴(kuò)大發(fā)酵培養(yǎng)，并對(duì)其次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行了初步抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯與正丁醇部分均具有抑制 U2OS人骨肉瘤細(xì)胞活性，乙酸乙酯部分活性強(qiáng)于正丁醇部分。
　　對(duì)Lethariellazahlbruckneri地衣體進(jìn)行了系統(tǒng)的試管預(yù)試，初步確定出其次生代謝產(chǎn)物的化學(xué)組分:酚類(lèi)、糖類(lèi)、內(nèi)酯香豆素類(lèi)、揮發(fā)

3、油及少量甾體萜類(lèi)。然后通過(guò)柱色譜分離純化與生物活性測(cè)定跟蹤相結(jié)合的研究方法來(lái)篩選活性成分。
　　首先將 Lethariellazahlbruckneri地衣體用甲醇超聲提取然后依次用乙酸乙酯、正丁醇、水萃取，對(duì)三部分浸膏選用了五種有代表性的菌種進(jìn)行活性測(cè)試，根據(jù)抑菌試驗(yàn)情況決定對(duì)乙酸乙酯部分進(jìn)行進(jìn)一步分離。通過(guò)G-254硅膠柱層析，乙酸乙酯浸膏共分得五部分:F1、F2、F3、F4、F5，同樣方法，進(jìn)行抑菌活性實(shí)驗(yàn)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，決

4、定對(duì)活性最強(qiáng)的F1部分再分離。F1經(jīng)柱層析得到兩部分，經(jīng)葡聚糖凝膠柱 Sephadex LH-20，半制備型 HPLC進(jìn)行純化處理，得到 LE1，LE2經(jīng)檢測(cè)為兩個(gè)單體化合物。通過(guò)對(duì)單體化合物L(fēng)E1與 LE2的物理、化學(xué)性質(zhì)分析及有機(jī)波譜解析，結(jié)合文獻(xiàn)資料，推斷出 LE1為Depsides類(lèi)化合物atranorin，LE2為Depsidones類(lèi)化合物norstictic acid，二者均為已知化合物。LE1，LE2對(duì)枯草芽孢桿菌活性測(cè)