缺血-缺氧對心臟胰島素樣生長因子2受體表達(dá)調(diào)控的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、盡管心血管疾病的治療方法現(xiàn)已取得了巨大的進(jìn)展，但是各種心臟疾病導(dǎo)致的心力衰竭在全球仍然具有很高的發(fā)病率和死亡率。心力衰竭是一種由多因素引起的疾病，內(nèi)在的分子機(jī)制還不是很清楚，但很可能與潛在的基因和蛋白質(zhì)表達(dá)改變有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)證明胰島素樣生長因子2受體（insulin-like growth factor2receptor，IGF-2R）在心衰患者心臟組織的表達(dá)顯著提高，提示IGF-2R可能在心力衰竭的發(fā)生中起重要的作用。本實(shí)驗(yàn)檢測了

2、IGF-2R在大鼠心肌梗死不同時(shí)間點(diǎn)后的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，并在體外以缺氧無血清模擬心肌缺血缺氧環(huán)境，研究IGF-2R在心肌細(xì)胞缺氧無血清時(shí)表達(dá)的變化以及其與細(xì)胞凋亡的關(guān)系，為闡明IGF-2R在心肌梗死后心力衰竭發(fā)生發(fā)展過程中的作用奠定基礎(chǔ)。
　　 本論文主要包括以下研究內(nèi)容：
　　 1雄性SD大鼠180只隨機(jī)分為兩組：心肌梗死模型組和假手術(shù)對照組。通過結(jié)扎大鼠左冠狀動(dòng)脈前降支制作大鼠心梗模型，梗死后1天、3天、7天、2周、4

3、周和8周取大鼠左心室組織，采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbentassay，ELISA）檢測大鼠心肌梗死區(qū)IGF-2R的表達(dá)變化規(guī)律。結(jié)果表明，大鼠心肌梗死后1天、3天IGF-2R表達(dá)下降，隨后逐漸恢復(fù)至正常。
　　 2體外模擬心肌缺血缺氧環(huán)境，觀察IGF-2R在心肌細(xì)胞缺氧無血清時(shí)表達(dá)的變化。離體培養(yǎng)SD乳鼠心肌細(xì)胞，缺氧無血清處理不同時(shí)間點(diǎn)后收獲細(xì)胞，應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR

4、）和實(shí)時(shí)定量RT-PCR（real time RT-PCR）測定IGF-2RmRNA水平的表達(dá)變化，并進(jìn)一步應(yīng)用ELISA方法檢測IGF-2R在蛋白水平的改變。與對照組相比，IGF-2R mRNA在缺氧無血清處理12h和24h后表達(dá)顯著增高，缺氧無血清24h后IGF-2R蛋白表達(dá)也升高。
　　 3采用脂質(zhì)體介導(dǎo)siRNA轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞抑制IGF-2R mRNA的表達(dá)后，采用流式細(xì)胞儀檢測IGF-2R對缺氧無血清引起的心肌細(xì)胞凋亡的