豬IFN-α1、IFN-β1、白細(xì)胞介素1α和白細(xì)胞介素1β四個細(xì)胞因子基因的克隆和序列分析.pdf

1、本實驗直接用豬肝細(xì)胞和經(jīng)脂多糖(LPS)刺激的巴馬小型豬外周血白細(xì)胞提取細(xì)胞總RNA，用RT-PCR方法擴(kuò)增豬干擾素-α1(lFN-α1)、干擾素-β1(lFN-β1)和白細(xì)胞介素1α(lL-1α)、白細(xì)胞介素1β(lL-lβ)，將其分別克隆到pMD18-T載體，進(jìn)行PCR、酶切鑒定并預(yù)測其編碼蛋白的結(jié)構(gòu)。 結(jié)果顯示，克隆的lFN-α1基因序列與GenBank上登錄的豬lFN-α1基因序列同源性為100％，氨基酸序列同源性為1

2、00％，其核酸序列和推導(dǎo)的氨基酸序列與牛、人、犬和鼠的同源性分別為81.4％、78.6％、71.8％、70.5％和67.2％、65.1％、52.9％、55％?？寺〉膌FN-β1基因序列與GenBank上登錄的豬lFN-β1基因序列同源性為99.6％，氨基酸序列同源性為99.5％，其核酸序列與推導(dǎo)的氨基酸序列與馬、貓、人和牛的同源性分別為80.4％、78.4％、78.1％、76.8％和66.1％、65.1％、63.4％、60.2％。

3、 克隆的巴馬小型豬lL-1α基因序列與GenBank上登錄的豬lL-1α基因序列同源性為99.9％，氨基酸序列同源性為100％，其核酸序列和推導(dǎo)的氨基酸序列與水牛、山羊、黃牛、綿羊、馬、貓、狗、人、兔子的同源性分別在88.4％、88.4％、88.2％、88.1％、87.7％、83.9％、83.7％、81.8％、78.7％和84.7％、84.7％、83.6％、83.6％、81.1％、75.9％、75.1％、70.0％、68.5％。克隆

4、的巴馬小型豬lL-1β基因序列與GenBank上登錄的豬lL-11β基因序列同源性為99.9％，氨基酸序列同源性為100％，其基因序列和推導(dǎo)的氨基酸序列與水牛、黃牛、山羊、綿羊、狗、人、兔子、貓、鼠的同源性分別為82.8[％]、82.8[％]、81.8[％]、81.3[％]、77.7[％]、75.5[％]、75.2[％]、75.1[％]、72.5[％]和71.1[％]、70.7[％]、70.3[％]、70.3[％]、64.9[％]、60