纈沙坦對(duì)擴(kuò)張型心肌病心衰大鼠鈣調(diào)控蛋白和炎性細(xì)胞因子的影響.pdf

1、目的：探討血管緊張素Ⅱ-1型受體阻滯劑纈沙坦對(duì)擴(kuò)張型心肌病(DCM)心衰大鼠心肌鈣調(diào)控蛋白[肌漿網(wǎng)鈣泵(SERCA2a)、鈣釋放通道(RyR2)、受磷蛋白(PLB)、鈉鈣交換蛋白(NCXl)]和炎性細(xì)胞因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)的影響及意義。 方法：SD大鼠經(jīng)腹腔注射多柔比星(2mg/kg/周×8周)，建立DCM模型。隨機(jī)分為DCM對(duì)照組(M組n=11)、纈沙坦組(V組n=10)、正常對(duì)照組(C組n=10)。V組予

2、以纈沙坦30mg/kg/d，C組和M組予以生理鹽水，灌胃，共8周。第9周進(jìn)行心臟超聲和血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)左室舒張末徑(LVEDD)、左室收縮末徑(LVESD)、左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)、左心室壓峰值(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)、左室最大壓力上升及下降速度(±LVdp/dtmax)。用放射免疫法測(cè)定大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β濃度。隨即處死大鼠，測(cè)定左心室重量(LVAW)及指數(shù)(LVWI)，右心室重量(RVAW)及指數(shù)

3、(RVWI)。用RT-PCR和Western blot法分別測(cè)定心肌肌漿網(wǎng)鈣(SERCA2a)、鈣釋放通道(RyR2)、受磷蛋白(PLB)、鈉鈣交換蛋白(NCX1)的mRNA及蛋白表達(dá)水平。心肌組織行HE和VG染色，進(jìn)行病理學(xué)檢查、分析心肌膠原含量(CVF)。 結(jié)果：1.同正常對(duì)照組相比，造模組大鼠在多柔比星注射8周后，LVEDD、LVESD顯著增大(均P＜0.05)，LVEF顯著下降(P＜0.05)，符合DCM心臟超聲特征。2

4、.纈沙坦干預(yù)8周后，(1)心臟彩超結(jié)果：與C組相比，M組LVEDD顯著增大[(7.1±0.4)vs(5.6 4-0.3)mm，P＜0.05]；LVEF顯著下降[(77.1 ±2.0)vs(89.7±1.8)％，P＜0.05]。V組LVEDD為(6.0±0.2)mm，較M組減小(P＜0.05)；LVEF為(86.0±1.2)％，較M組顯著上升(P＜0.05)。(2)血流動(dòng)力學(xué)結(jié)果：與C組相比，M組LVSP著下降[(109.5±4.0)vs

5、(13 1.8±1.7)mmHg，P＜0.05]；4-LVdp/dtmax也明顯下降[(3679.5±260.0)vs(624 1.7±237.3)mmHg/s和(-2748.9±3：240.0)vs(-5 134.4±160.5)mmHg/s，均P＜0.05]；LVEDP顯著上升[(21.2±1.2)vs(4.14±1.0)mmHg，P＜0.05]。V組LVSP為(1 1 5.5±3.5)mmHg，高于M組（P＜0.05)；+LVdp

6、/dtmax分別為(4837.2±237.8)mmHed/s、(-3722.8±167.2)mmHg/s，均較M組顯著上升(均P＜0.05)；LVZDP為(13.24±1.0)mmHg，較M組下降(P＜0.05)。(3)心室重量測(cè)定：與C組相比，M組左室重量及指數(shù)顯著增加[(925.2±46.2)vs(736.6±26.5)mg≧和(2.24±0.21)vs(1.71 ±0.11)，均P＜0.05]；V組左室重量及指數(shù)分別為(790.5

7、±30.7)mg和(1.87±0.14)，均低于M組(均P＜0.05)。(4)心肌膠原含量結(jié)果：MNCW較C組顯著升高[(13.79 ±1.14)％vs(1.91±0.22)％，P＜0.05]；V組CVF為(5.44±0.42)％，顯著低于M組(P＜0.05)。(5)心肌鈣調(diào)控蛋白測(cè)定結(jié)果：與C組比，M組SERCA2a、RyR2的mRNA水平顯著下降[(0.38 4±0.09)vs(0.75±0.10)和(0.36±0.07)vs(0.

8、68±0.14)，均P＜0.05]；PLB、NCXl的mRNA水平顯著上升[(0.64±0.12)vs(0.30±0.09)和(0.58±0.11)vs(0.24±0.06)，均P＜0.05]。VNSERCA2a、gyR2的mRNA水平分別為[(0.59±0.12)和(0.57±0.09)]，均較MN升高(均P＜0.05)；V組PLB、NCXl的mRNA水平分別為[(0.42+0.08)和(0.37±0.08)]，均低于M組(均P＜0.

9、05)。與C組比，M組NSERCA2a、RyR2蛋白水平顯著降低[(0.31±0.04)vs(0.69±0.07)和(0.29±0.09)vs(0.60±0.12)，均P＜0.05]；PLB、NCXl蛋白水平顯著升高[(0.69±0.08)vs(0.036±0.06)和(0.68+0.10)vs(0.35±0.05)，均P＜0.05]。V組SERCA2a、RyR2蛋白水平分別為[(0.54±0.06)和(0.49±0.10)]，均高于M

10、組(均P＜0.05)；V組NCXl蛋白水平為(0.44±0.07)，較M組顯著降低(P＜0.05)；V組PLB蛋白水平為(0.65±0.11)，較MN稍有下降，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。(6)炎性細(xì)胞因子測(cè)定結(jié)果：M組血清TNF-α、IL-6、IL-β濃度分別為(20.31±1.98)fmol/ml、(0.31±0.03)ng/ml、(0.27±0.04)ng/ml，C組分別為Ofmol/ml、(0.15±0.02)ng/ml、(0

11、.12±0.02)ng/ml，M組顯著高于C組(均P＜0.05)；V組血清TNF-α、IL-β濃度分別為(13.48±1.12)fmol/ml、(0.22±0.03)ng/ml、(0.17+0.02)ng/ml，均顯著低于M組(均P＜0.05)。 結(jié)論：AT-1受體阻滯劑纈沙坦能有效地改善DCM的心臟舒縮功能，部分逆轉(zhuǎn)心室重塑，其機(jī)制可能與其部分糾正心肌鈣調(diào)控蛋白SERCA2a、RyR2、PLB、NCXl的異常及抑制炎性細(xì)胞因子