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1、目的:以往的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明,重組人生長(zhǎng)激素(rhGH)能夠促進(jìn)短腸大鼠的腸粘膜增殖,促進(jìn)腸粘膜對(duì)糖、脂肪、氨基酸的吸收,但這些研究在生長(zhǎng)激素的應(yīng)用時(shí)間長(zhǎng)短和劑量大小上并不一致,并且缺乏應(yīng)用劑量和時(shí)間的理論依據(jù)。本課題研究了不同劑量的生長(zhǎng)激素、應(yīng)用不同時(shí)間后,短腸大鼠康復(fù)效果的差別,并探討其中的機(jī)制。 方法:本實(shí)驗(yàn)分兩部分,第一部分,雄性Sprague-Dawley大鼠56只,制備成短腸動(dòng)物模型,保留近端空腸7cm和遠(yuǎn)端回腸7c
2、m,短腸動(dòng)物隨機(jī)分成8組,生長(zhǎng)激素應(yīng)用1周的短腸模型分為短腸腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組(E),應(yīng)用GH0.5U/kg/d組(低劑量組),GH1.0U/kg/d組(中劑量組),GH2.0U/kg/d組(高劑量組),生長(zhǎng)激素應(yīng)用2周的分為同樣4組,生長(zhǎng)激素予以皮下注射,手術(shù)后第4天開(kāi)始應(yīng)用,分別在應(yīng)用生長(zhǎng)激素1周、2周后終止實(shí)驗(yàn),取肝臟標(biāo)本行RT-PCR檢查,分析生長(zhǎng)激素受體的mRNA的變化,流式細(xì)胞儀檢查肝細(xì)胞受體蛋白的變化、殘存回腸粘膜增殖情況。在第一
3、部分的基礎(chǔ)上,選定7只雄性Sprague-Dawley大鼠制備成短腸模型,GH劑量為2.0U/kg/d情況下應(yīng)用3周,同樣方法觀(guān)察GHR和回腸粘膜的增殖。 結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)中,給予短腸大鼠應(yīng)用生長(zhǎng)激素后,2周內(nèi)隨劑量的增加和時(shí)間的延長(zhǎng),生長(zhǎng)激素受體在mRNA水平和蛋白水平出現(xiàn)增加,與其他組相比,GH2.0U/kg/d組肝臟生長(zhǎng)激素受體上調(diào)及腸粘膜增殖作用顯著(P<0.05),在GH2.0U/kg/d劑量下,3周后受體在mRNA和蛋白
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