乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀腫瘤中Ezrin、Ki-67、P63及CK34βE12的表達(dá)研究.pdf

1、目的：乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀腫瘤包括一組病變：良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤及導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌。由于三者的分子生物學(xué)基礎(chǔ)、預(yù)后及臨床處理存在較大差異，有必要準(zhǔn)確區(qū)分三者。當(dāng)病變不典型時(shí)往往存在鑒別診斷困難的情況，尤其是良性乳頭狀瘤同非典型乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤同導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌的鑒別診斷。從形態(tài)上鑒別這兩組疾病往往帶有一定的主觀性，并造成這兩組疾病診斷重復(fù)性很差；而病理診斷的準(zhǔn)確性直接影響手術(shù)方式的選擇，手術(shù)方式對(duì)以上疾病的預(yù)后又有直接影響。隨著

2、分子生物學(xué)的飛速進(jìn)展和各種高新生物技術(shù)的不斷涌現(xiàn)，腫瘤標(biāo)志物的研究已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)界研究的焦點(diǎn)。因而尋找可靠和實(shí)用的腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行輔助診斷，早期發(fā)現(xiàn)癌變傾向，彌補(bǔ)形態(tài)學(xué)方面的缺憾，可減少因治療不足導(dǎo)致的后期癌變率。根據(jù)乳腺導(dǎo)管內(nèi)良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤及導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌臨床診斷和鑒別診斷中的實(shí)際問(wèn)題，本研究采用免疫組化非生物素兩步法fTM法、)聯(lián)合檢測(cè)乳腺導(dǎo)管內(nèi)良性乳頭狀瘤，非典型乳頭狀瘤及乳頭狀癌中Ki-67抗原、EZrin蛋白、34

3、βE12角蛋白及P63等在蛋白水平上的表達(dá)情況，分析其表達(dá)與乳腺導(dǎo)管內(nèi)良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤及導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌之間的相關(guān)性，探討Ezrin、Ki-67、P63及34βE12作為腫瘤標(biāo)記物在乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀腫瘤良惡性病變鑒別診斷中的價(jià)值。 材料與方法：收集邢臺(tái)市腫瘤醫(yī)院，金能集團(tuán)總醫(yī)院及邢臺(tái)市第三醫(yī)院2001年10月-2006年10月手術(shù)切除的3596例乳腺腫瘤，按照2003年WHO新的乳腺腫瘤與遺傳學(xué)分類標(biāo)準(zhǔn)，從中挑選出導(dǎo)管

4、內(nèi)良性乳頭狀瘤30例，非典型乳頭狀瘤28例，導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌26例，均為石蠟包埋組織，共84例。所有病例術(shù)前均未行放、化療及免疫治療，臨床資料完整，并均經(jīng)病理組織學(xué)確診。采用免疫組化非生物素兩步法(TM法)聯(lián)合檢測(cè)腫瘤組織中Ezrin、Ki67、P63及34βE12在蛋白水平上的表達(dá)情況，分析其臨床病理意義，特別是在腫瘤鑒別診斷中的意義。 結(jié)果 1．Ezrin在各種乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤中的表達(dá)情況 Ezrin蛋白陽(yáng)性

5、反應(yīng)位于腫瘤細(xì)胞膜或/和細(xì)胞漿，呈棕黃色顆粒。30例良性導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤中，25例Ezrin呈單純細(xì)胞膜著色，另外5例除細(xì)胞膜陽(yáng)性著色外，還可見(jiàn)少量細(xì)胞漿陽(yáng)性著色；28例導(dǎo)管非典型乳頭狀瘤中，15例呈單純細(xì)胞膜陽(yáng)性著色，13例為細(xì)胞膜和細(xì)胞漿共同著色。而在26例導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌中14例。Ezrin陽(yáng)性反應(yīng)定位于細(xì)胞漿，核膜著色不明顯。在良性乳頭狀瘤組、非典型乳頭狀瘤組、導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌組中Ezrin細(xì)胞漿的陽(yáng)性異常表達(dá)率分別為3.3％、32.

6、1％和53.8％。從良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤到導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌．Ezrin細(xì)胞漿的陽(yáng)性異常表達(dá)呈逐步遞增趨勢(shì)，導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌組中Ezrin細(xì)胞漿的異常表達(dá)率明顯高于良性和非典型導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤組(P<0.05)。Ezrin在細(xì)胞漿中的陽(yáng)性異常表達(dá)提示其可能參與了乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤的癌變過(guò)程，可作為乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤良惡性質(zhì)鑒別診斷的標(biāo)記物。 2．Ki-67在各種乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤中的表達(dá)情況 Ki-67陽(yáng)性免疫反應(yīng)產(chǎn)物呈

7、棕黃色顆粒狀，定位于乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞核。良性導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤組、非典型乳頭狀瘤組和導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌組Ki67的陽(yáng)性異常表達(dá)率分別為20.0％、42.9％和73.1％。從良性導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤到導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌Ki67的陽(yáng)性異常表達(dá)呈逐步遞增趨勢(shì)，導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌組中Ki67的陽(yáng)性異常表達(dá)率明顯高于良性導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤組和非典型乳頭狀瘤組(P<0.05)。 本研究結(jié)果表明，Ki67可以反映乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤的增殖程度

8、和生物學(xué)行為，在各類乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀腫瘤的鑒別診斷中具有一定參考價(jià)值。 3．P63在各種乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤中的表達(dá)情況 P63定位于乳腺肌上皮細(xì)胞核，陽(yáng)性染色為細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。在30例乳腺良性乳頭狀瘤腺體周圍可見(jiàn)P63陽(yáng)性表達(dá)的肌上皮，呈連續(xù)性分布，核著色程度強(qiáng)。而在28例乳腺非典型乳頭狀瘤及26例導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌的腺體周圍，肌上皮細(xì)胞數(shù)目減少呈間斷或不連續(xù)環(huán)狀，且核著色程度弱。P63在良性乳頭狀瘤組、非典型性乳頭

9、狀瘤組和導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌組中異常表達(dá)率分別為10.0％、39.3％、88.5％。P63在導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌組中的異常表達(dá)率較之良性導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤組與非典型乳頭狀瘤組明顯增高(P<0.05)。綜上研究結(jié)果提示：P63可以作為乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀腫瘤良惡性鑒別診斷的一種良性病變標(biāo)記物。 4．34βE12角蛋白在各種乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤中的表達(dá)情況 34βE12主要定位于乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤細(xì)胞膜，陽(yáng)性染色為細(xì)胞膜及部分細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆

10、粒。34βE12在良性導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤中主要表現(xiàn)為完整的細(xì)胞膜強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，細(xì)胞質(zhì)有少量陽(yáng)性表達(dá)；在導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌細(xì)胞的表達(dá)，則表現(xiàn)以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)見(jiàn)陽(yáng)性顆粒為主，較少見(jiàn)完整的細(xì)胞膜陽(yáng)性，而且陽(yáng)性強(qiáng)度也較良性病變明顯減弱；在導(dǎo)管內(nèi)非典型乳頭狀瘤中的表達(dá)情況則界于二者之間。34βE12在良性乳頭狀瘤組、非典型乳頭狀瘤組和導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌組中異常表達(dá)率分別為16.7％、53.6％、96.2％。在導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌中的異常表達(dá)率較之良性導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤組與非典

11、型乳頭狀瘤組明顯增高(P<0.05)。本研究結(jié)果顯示，上皮細(xì)胞出現(xiàn)34βE12顯著異常表達(dá)時(shí)高度提示為癌。 5．乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀腫瘤Ezrin、Ki-67、34βE12與P63表達(dá)的關(guān)系 Spearman等級(jí)相關(guān)分析結(jié)果表明，Ezrin與Ki-67在乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀腫瘤中的表達(dá)呈正相關(guān)。34βE12與P63在乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀腫瘤中的表達(dá)呈正相關(guān)。 結(jié)論 1、Ezrin在乳腺導(dǎo)管內(nèi)良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀

12、瘤和乳頭狀癌細(xì)胞中的異常表達(dá)呈逐步遞增趨勢(shì)，提示其可能參與了乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤的癌變過(guò)程，可作為乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤良惡性質(zhì)鑒別診斷的標(biāo)記物。 2、從導(dǎo)管內(nèi)良性乳頭狀瘤、非典型乳頭狀瘤到導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀癌Ki67的異常表達(dá)呈逐步遞增趨勢(shì)，表明Ki67可以反映乳腺導(dǎo)管乳頭狀腫瘤的增殖程度和生物學(xué)行為，在各類乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀腫瘤的鑒別診斷中具有一定的參考價(jià)值。 3、乳腺良性乳頭狀瘤腺體周圍均可見(jiàn)連續(xù)性分布P63強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)的肌上皮細(xì)