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1、目的:為探討成釉細(xì)胞瘤的臨床病理與生物學(xué)行為的關(guān)系,采用免疫組化方法檢測(cè)抗凋亡蛋白P63、Bcl-2,腫瘤增殖抗原PCNA、Ki-67、MCM2蛋白,在成釉細(xì)胞瘤濾泡型和叢狀型中的表達(dá)情況,進(jìn)行定性及定量分析。結(jié)合腫瘤包膜侵犯及臨床復(fù)發(fā)情況,探討了成釉細(xì)胞瘤的生物學(xué)行為與臨床病理及P63、Bcl-2、PCNA、Ki-67、MCM2的關(guān)系,為腫瘤臨床預(yù)后的判斷提供了實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。
方法:
1.臨床資料標(biāo)本取自河
2、北醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)院收治的手術(shù)切除并存檔的成釉細(xì)胞瘤患者蠟塊60例,所有病例均具有完整的臨床病理資料?;颊咝詣e男28例,女32例;年齡19~67歲,平均年齡42.5歲;部位發(fā)生于上頜骨者12例,下頜骨者48例。另外留取正常口腔黏膜標(biāo)本10例進(jìn)行對(duì)照。
2.PV-9000免疫組化方法按照PV-9000二步法免疫組化檢測(cè)試劑盒的說(shuō)明操作。
3.陽(yáng)性結(jié)果判定 P63、PCNA、Ki-67和MCM2表達(dá)部位,以細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色
3、顆粒為陽(yáng)性,Bcl-2以胞漿著色為陽(yáng)性。P63、Bcl-2和MCM2計(jì)算陽(yáng)性率,PCNA和Ki-67計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞的增殖指數(shù)。
4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)數(shù)資料采用X2檢驗(yàn),計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)及非參數(shù)檢驗(yàn),以ɑ=0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
結(jié)果:
1.按照2005年《WHO牙源性腫瘤組織學(xué)分型》的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)所選蠟塊進(jìn)行常規(guī)HE染色復(fù)查,明確診斷為濾泡型30例,叢狀型30例
4、。其中腫瘤侵犯包膜10例,隨訪術(shù)后復(fù)發(fā)25例。
2.P63蛋白在成釉細(xì)胞瘤及牙齦中的表達(dá):P63于細(xì)胞核中蛋白免疫反應(yīng)陽(yáng)性表達(dá)呈棕色。成釉細(xì)胞瘤濾泡型中的陽(yáng)性細(xì)胞主要分布于上皮島的周邊細(xì)胞及中央的星網(wǎng)狀細(xì)胞,叢狀型主要在上皮條索周邊細(xì)胞中表達(dá);牙齦的棘層及少量基底層細(xì)胞中呈陽(yáng)性表達(dá)。P63在成釉細(xì)胞瘤濾泡型中陽(yáng)性表達(dá)率低于叢狀型(P<0.05)。P63在正常組中的陽(yáng)性表達(dá)與成釉細(xì)胞瘤濾泡型之間差異有顯著性(P<0.05),與叢
5、狀型之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。P63的陽(yáng)性表達(dá)在腫瘤的包膜侵犯及術(shù)后復(fù)發(fā)方面均具有顯著性差異(P<0.05)。
3.Bcl-2蛋白在成釉細(xì)胞瘤及牙齦中的表達(dá):Bcl-2在成釉細(xì)胞瘤中的陽(yáng)性表達(dá)主要位于外周立方狀或柱狀細(xì)胞及少數(shù)的星網(wǎng)狀細(xì)胞中,Bcl-2在胞漿或胞膜中陽(yáng)性表達(dá),呈棕黃色;Bcl-2在牙齦中呈現(xiàn)陰性表達(dá)。Bcl-2在成釉細(xì)胞瘤濾泡型與叢狀型中的表達(dá)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與正常組之間差異有顯著性(
6、P<0.05)。
4.PCNA蛋白在成釉細(xì)胞瘤及牙齦中的表達(dá):PCNA的免疫標(biāo)記在核及核仁內(nèi),呈棕黃色或棕褐色。在成釉細(xì)胞瘤中,PCNA主要在上皮島及條索的周邊細(xì)胞及部分星網(wǎng)狀細(xì)胞中表達(dá);牙齦的部分棘層深部及基底層細(xì)胞中呈陽(yáng)性表達(dá)。PCNA在成釉細(xì)胞瘤濾泡型與叢狀型中的表達(dá)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與正常組之間差異有顯著性(P<0.05)。
5.Ki-67蛋白在成釉細(xì)胞瘤及牙齦中的表達(dá): Ki-67在細(xì)胞核中
7、陽(yáng)性表達(dá),呈棕黃色或棕褐色。主要表達(dá)區(qū)域:濾泡型主要位于上皮島周邊細(xì)胞及部分星網(wǎng)狀細(xì)胞,叢狀型主要位于終端條索周邊細(xì)胞;在牙齦的棘層深部及基底層細(xì)胞中少量表達(dá)。成釉細(xì)胞瘤濾泡型中Ki-67增殖指數(shù)高于叢狀型的增殖指數(shù)(P<0.05)。與正常組之間差異有顯著性(P<0.05)。Ki-67在包膜侵犯病例中的增殖指數(shù)與無(wú)包膜侵犯病例中的增殖指數(shù)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在術(shù)后復(fù)發(fā)病例中的增殖指數(shù)高于在無(wú)復(fù)發(fā)病例中的增殖指數(shù),差異有顯著
8、性(P<0.05)。
6.MCM2蛋白在成釉細(xì)胞瘤及牙齦中的表達(dá):MCM2在細(xì)胞核中陽(yáng)性表達(dá),陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)以上皮島及條索的外周立方狀和柱狀細(xì)胞為主,星網(wǎng)狀細(xì)胞僅有少量表達(dá);牙齦棘層和基底層細(xì)胞中有陽(yáng)性表達(dá)。MCM2在成釉細(xì)胞瘤濾泡型中的陽(yáng)性率明顯高于叢狀型(P<0.05)。與正常組之間差異有顯著性(P<0.05)。MCM2在包膜侵犯病例中的增值指數(shù)與無(wú)包膜侵犯病例中的增值指數(shù)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在術(shù)后復(fù)發(fā)病例中
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