食管鱗癌中NF-κBp50、p65、MMP-9及ICAM-1的表達(dá)及意義.pdf

1、食管癌是我國(guó)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在我國(guó)食管癌的死亡率居惡性腫瘤的第四位，而食管癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移又是引起食管癌患者死亡的主要原因，因此對(duì)食管癌發(fā)生、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移機(jī)制的探討己成為研究的熱點(diǎn)之一。 核轉(zhuǎn)錄因子-кB(nucleartranscription factor-кB，NF-кB)，是一類(lèi)重要的核轉(zhuǎn)錄因子，主要形式為p50和p65組成的二聚體，p50是與DNA結(jié)合的部位，p65參與基因轉(zhuǎn)錄的起始調(diào)節(jié)，并可促進(jìn)p50與DNA結(jié)合。它可

2、調(diào)控多種基因的表達(dá)，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移均有著密切的關(guān)系?；|(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMPs)是一個(gè)含鋅離子的肽鏈內(nèi)切酶家族，可降解細(xì)胞外基質(zhì)，從而參與惡性腫瘤的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移，MMP-9屬于其中的明膠酶類(lèi)。細(xì)胞問(wèn)粘附分子-1(InterceUular adhesion molecule 1，ICAM一1)是一種非常重要的細(xì)胞粘附分子，它可以調(diào)節(jié)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)問(wèn)的相互結(jié)合，被認(rèn)

3、為在腫瘤的局部浸潤(rùn)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中起著重要的作用。 研究表明，乳腺癌、胃癌、肺癌等多種腫瘤組織中NF-кB激活后可上調(diào)MMP-9和ICAM-1蛋白的表達(dá)，促進(jìn)惡性腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移。但在食管鱗癌組織中關(guān)于NF-кB p50、p65和MMP-9、ICAM-1關(guān)系的研究，目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究采用免疫組化SP法及原位雜交技術(shù)聯(lián)合檢測(cè)NF-кB p50、p65蛋白及mRNA在食管鱗癌及癌旁粘膜組織(原位癌、不典型增生組織及正常食管粘膜上

4、皮)中的表達(dá)，從蛋白及mRNA水平觀察NF-<,к>B與食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系；以免疫組化SP法檢測(cè)．MMP-9、ICAM-1蛋白在食管鱗癌組織及癌旁粘膜組織中的表達(dá)，并探討NF-<,к>B p50、p65、MMP-9、ICAM-1在食管鱗癌發(fā)生及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中的作用及其相互關(guān)系。材料和方法49例食管癌手術(shù)切除標(biāo)本取自鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院，所有病例術(shù)前均無(wú)化療、放療及免疫治療史。病理組織學(xué)證實(shí)49例食管癌均為鱗狀細(xì)胞癌，其中Ⅰ級(jí)24例，Ⅱ

5、級(jí)16例，Ⅲ級(jí)9例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組23例，手術(shù)清掃的食管周?chē)馨徒Y(jié)中發(fā)現(xiàn)癌轉(zhuǎn)移；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組26例，食管周?chē)馨徒Y(jié)中未發(fā)現(xiàn)癌轉(zhuǎn)移。浸潤(rùn)深度分兩組，淺層組13例，腫瘤浸潤(rùn)深度在粘膜層、粘膜下層或淺肌層；深層組36例，腫瘤浸潤(rùn)深度在深肌層或外膜層。每例標(biāo)本均在癌灶及癌旁粘膜組織處分別取材。應(yīng)用免疫組化SP法及原位雜交技術(shù)檢測(cè)NF-<,к>B p50、p65在食管鱗癌及癌旁粘膜組織中的表達(dá)，從蛋白及mRNA水平觀察NF-<,к>3 p50、p

6、65與食管鱗癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系；以免疫組化SP法檢測(cè)了MMP-9、ICAM-1蛋白在食管鱗癌及癌旁粘膜組織中的表達(dá)。利用SPSS10．0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，兩樣本率的比較采用四格表資料x(chóng)<'2>檢驗(yàn)；多樣本率的比較采用行列表資料的x<,2>檢驗(yàn)；相關(guān)性檢驗(yàn)用Spearman相關(guān)分析。以α=0．05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。 結(jié)果 1．NF-<,к>B p50蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率在癌旁正常粘膜上皮、不典型增生組織、原位癌及浸潤(rùn)癌

7、組織中分別是28．1﹪，36．8﹪，33．3﹪，55．1﹪，浸潤(rùn)癌與癌旁正常粘膜上皮相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。NF-<,к> B p65蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率在癌旁正常粘膜上皮、不典型增生組織、原位癌以及浸潤(rùn)癌中分別為18．8﹪，42．1﹪，50．O﹪，57．1﹪，浸潤(rùn)癌與癌旁正常粘膜上皮相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。 2．NF-<,к>B p50蛋白的表達(dá)與食管鱗癌分化程度、浸潤(rùn)深度有關(guān)(P<0．05)，但與

8、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)(P>0．05)(Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)食管鱗癌組織中分別為37．5﹪，62．5﹪，88．9﹪；深層浸潤(rùn)組為69．4﹪，淺層浸潤(rùn)組為15．4﹪；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為60．9﹪，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為50．0﹪)。 NF-<,к>B p65蛋白的表達(dá)與食管鱗癌浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有關(guān)(P<0.05)，而與分化程度無(wú)關(guān)(P<0.05)(深層浸潤(rùn)組為75.0﹪，淺層浸潤(rùn)組為7.7﹪；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為87.0﹪，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為30.8﹪；Ⅰ級(jí)、Ⅱ

9、級(jí)、Ⅲ級(jí)食管鱗癌組織中分別為41.7﹪，68.8﹪，77.8﹪)。 3.NF-κB p50 mRNA的陽(yáng)性表達(dá)率在癌旁正常粘膜上皮、不典型增生組織、原位癌及浸潤(rùn)癌中分別為21.9﹪，31.6﹪，41.7﹪，53.1﹪，浸潤(rùn)癌與癌旁正常粘膜上皮相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。NF-κB p65 mRNA的陽(yáng)性表達(dá)率在癌旁正常粘膜上皮、不典型增生組織、原位癌及浸潤(rùn)癌中分別是18.8﹪，36.8﹪，33.3﹪，55.1﹪，浸潤(rùn)癌與癌旁

10、正常粘膜上皮相比，差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 4.NF-κB p50 mRNA的表達(dá)與食管鱗癌的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)(深層浸潤(rùn)組為66.7﹪，淺層浸潤(rùn)組為15.4﹪；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為78.3﹪，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為30.8﹪)，與分化程度無(wú)關(guān)(P<0.05)(Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)食管鱗癌組織中分別為37.5﹪，62.5﹪，77.8﹪)。 NF-κB p65 mRNA的表達(dá)也與食管的鱗癌浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有

11、關(guān)(P<0.05)(深層浸潤(rùn)組為69.4﹪，淺層浸潤(rùn)組為15.4﹪；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為73.9﹪，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為38.5﹪)，而與分化程度無(wú)關(guān)(P>0.05)(Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)食管鱗癌組織中分別為45.8﹪，50.0﹪，88.9﹪)。 5.MMP-9蛋白在癌旁正常粘膜上皮、不典型增生組織、原位癌及浸潤(rùn)癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率呈逐漸升高趨勢(shì)(其陽(yáng)性率分別為34.4﹪，52.6﹪，58.3﹪，71.4﹪)，食管鱗癌組織中MMP.9蛋白的陽(yáng)

12、性表達(dá)率顯著高于癌旁正常粘膜上皮(P<0.05)。ICAM-1蛋白在食管癌旁正常粘膜上皮、不典型增生組織及原位癌和浸潤(rùn)癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為0.0﹪，0.0﹪，0.0﹪，42.9﹪，浸潤(rùn)癌與癌旁粘膜組織相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 6.MMP-9蛋白的表達(dá)與食管鱗癌浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，但與分化程度無(wú)關(guān)(P>0.05)(Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)食管鱗癌組織中分別為58.3﹪，75.0﹪，100.0﹪

13、；深層浸潤(rùn)組為80.6﹪，淺層浸潤(rùn)組為46.2﹪；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為95.7﹪，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組50.0﹪)。ICAM.1蛋白的表達(dá)與食管鱗癌分化程度、浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有關(guān)(P<0.05)(Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)食管鱗癌組織中分別為16.7﹪，68.8﹪，66.7﹪；深層浸潤(rùn)組為52.8﹪，淺層浸潤(rùn)組為15.4﹪；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為69.6﹪，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組為19.2﹪)。 7.NF-кB p50、p65 mRNA的表達(dá)均與相應(yīng)蛋白的表達(dá)

14、呈正相關(guān)性(P<0.05)。 8.NF-кB p50和p65蛋白的表達(dá)和MMP-9及ICAM-1蛋白的表達(dá)之間均呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。 結(jié)論 1.食管鱗癌中NF-кB p50、p65蛋白及mRNA的陽(yáng)性表達(dá)率均顯著高于正常食管粘膜組織；從癌旁正常粘膜上皮、不典型增生組織、原位癌到浸潤(rùn)癌，NF-кBp50、p65蛋白及mRNA的陽(yáng)性表達(dá)率呈逐漸增高趨勢(shì)，提示其表達(dá)可能與食管鱗癌的發(fā)生有關(guān)。 2.NF

15、-кB p65蛋白及mRNA的表達(dá)均與食管鱗癌的浸潤(rùn)深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。提示NF-кB p65的活化可能對(duì)食管鱗癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移有促進(jìn)作用。 3．MMP-9、ICAM-1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)與食管鱗癌的浸潤(rùn)深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示MMP-9、ICAM-1的蛋白表達(dá)水平可反映食管鱗癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的潛能。 4.NF-кB p50、p65蛋白表達(dá)與MMP-9及：ICAM-1蛋白的表達(dá)均呈正相關(guān)。提示NF-кB-p50、p65蛋白的活化可