核轉(zhuǎn)錄因子κBP50、P65、CDK4和環(huán)氧合酶-2在食管鱗癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的： 為進(jìn)一步探討NF-κB p50p65基因與食管鱗癌發(fā)生和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，尋求早期檢測(cè)食管鱗癌發(fā)生和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的指標(biāo)及尋找抑制食管鱗癌發(fā)生和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的有效方法，本文采用原位雜交及免疫組化SP法檢測(cè)了49例食管鱗癌及食管癌旁粘膜組織中NF-κB p50p65mRNA和蛋白的表達(dá)情況；采用免疫組化SP法檢測(cè)了49例食管鱗癌及癌旁粘膜組織中CDK4蛋白和COX.2蛋白的表達(dá)，并探討了NF-κB p50p65、CDK4蛋白和ICOX

2、-2蛋白的相互關(guān)系。 材料與方法： 1.標(biāo)本：49例食管鱗癌組織標(biāo)本收集自鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2002年手術(shù)除標(biāo)本，所有病例術(shù)前均無(wú)化療、放療及免疫治療史。病理組織學(xué)證實(shí)49例食管癌均為鱗狀細(xì)胞癌，其中Ⅰ級(jí)24例，Ⅱ級(jí)16例，Ⅲ級(jí)9例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組23例，手術(shù)清掃的食管周?chē)馨徒Y(jié)中發(fā)現(xiàn)癌轉(zhuǎn)移；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組26例，食管周?chē)馨徒Y(jié)中未發(fā)現(xiàn)癌轉(zhuǎn)移。浸潤(rùn)深度分兩組。淺層組13例；深層組36例。每例標(biāo)本均又取癌旁粘膜包括單純?cè)錾?/p>

3、上皮33例；輕度不典型增生19例；重度不典型增生14例，原位癌12例及正常食管上皮32例。 2.方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry，IHC)SP法和原位雜交(insitu hybridization,ISH)方法檢測(cè)49例食管鱗癌中NF.K B p50、p65蛋白和mRNA、CDK4蛋白和COX-2蛋白的表達(dá)。 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 10.0軟件分析，率的比較采用X<'2>

4、檢驗(yàn)：相關(guān)性檢驗(yàn)用Spearman相關(guān)分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。 結(jié)果： 1.NF-κBp50蛋白在正常食管粘膜、單純?cè)錾⑤p度不典型增生、重度不典型增生、原位癌和浸潤(rùn)癌中的陽(yáng)性率分別是28.1﹪(9/32)、30.3﹪(10/33)、47.4﹪(9/19)、50.0﹪(7/14)、33.3﹪(4/12)和55.1﹪(27/49)，浸潤(rùn)癌組織與正常上皮、單純?cè)錾容^差異均有顯著性意義(P<0.05)。NF-κBp65蛋

5、白在正常食管粘膜、單純?cè)錾?、輕度不典型增生、重度不典型增生、原位癌和浸潤(rùn)癌中的陽(yáng)性率分別是18.8﹪(6/32)、18.2﹪(6/33)、36.8﹪(7/19)、42.9﹪(6/14)、50.0﹪(6/12)和157.1(28/49)。浸潤(rùn)癌中NF-κB p65蛋白的表達(dá)與正常上皮、單純?cè)錾容^差異均有顯著性(P<0.05)。p50蛋白在食管鱗癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)中的陽(yáng)性率逐漸增高，分別是37.5﹪、62.5﹪、88.9﹪，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

6、(P<0.05)；在淺層浸潤(rùn)組和深層浸潤(rùn)組中的陽(yáng)性率分別是15.4﹪和169.4﹪，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽(yáng)性率分別是60.9﹪和50.0﹪，其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；NF-кBp65蛋白在食管鱗癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)中的陽(yáng)性率逐漸增高，分別是41.7﹪、68.8﹪、77.8﹪，其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；在淺層浸潤(rùn)組和深層浸潤(rùn)組中的陽(yáng)性率分別是7.7﹪和175.0﹪，其差異有

7、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽(yáng)性率分別是87.0﹪和30.8﹪，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 2.NF-к Bp50mRNA在正常食管粘膜、單純?cè)錾?、輕度不典型增生、重度不典型增生、原位癌和浸潤(rùn)癌中的陽(yáng)性率分別是21.9﹪(7/32)、24.2﹪(8/33)、31.6﹪(6/19)、42.9﹪(6/14)、41.7﹪(5/12)和53.1﹪(26/49)，浸潤(rùn)癌中NF-к Bp50mRNA的表

8、達(dá)與正常上皮、單純?cè)錾M相比差異均有顯著性意義(P<0.05)。 3.CDK4蛋白在正常上皮和單純?cè)錾械年?yáng)性率是9.4﹪(3/／32)和24.2﹪(8/33)，在輕度不典型增生、重度不典型增生、原位癌和浸潤(rùn)癌中的陽(yáng)性率分別是42.1﹪(81/9)、64.3﹪(9/14)、66.7﹪(8/12)、77.6﹪(38/49)，與正常上皮比較差異均有顯著性意義(P<0.05)。CDK4蛋白在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)中的陽(yáng)性率分別是66．7﹪、87

9、．5﹪、88．9﹪，其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)，但其陽(yáng)性率有逐漸增高的趨勢(shì)；在淺層浸潤(rùn)組和深層浸潤(rùn)組中的陽(yáng)性率分別是46．2﹪和88．9﹪，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽(yáng)性率分別是95．7﹪和61．5﹪，其差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 4．COX-2蛋白在正常上皮和單純?cè)錾械年?yáng)性率是0.0﹪(0/32)和6．1﹪(2/33)，在輕度不典型增生、重度不典型增生、原位癌

10、和浸潤(rùn)癌中的陽(yáng)性率逐漸增高，分別是31．6﹪(6/19)、46．2﹪(6/14)、58．3﹪(7/12)、73．5﹪(36/49)，與正常上皮比較差異均有顯著性意義(P<0.05)。COX-2蛋白在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)中的陽(yáng)性率分別是62．5﹪、81．3﹪、88．9﹪，其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但其陽(yáng)性率有逐漸增高的趨勢(shì)；在淺層浸潤(rùn)組和深層浸潤(rùn)組中的陽(yáng)性率分別是38．5﹪和186．1﹪，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)

11、移組和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽(yáng)性率分別是91．3﹪乘157．7﹪，其差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 5．NF-<,к> Bp50蛋白與CDK4蛋白、COX-2蛋白在食管鱗癌中的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)；NF-<,к> Bp50mRNA與CDK4蛋白、COX-2蛋白在食管鱗癌中的表達(dá)也呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)；NF-<,к> Bp65蛋白與CDK4蛋白、COX-2蛋白在食管鱗癌中的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)；N

12、F-<,к> Bp65mRNA與CDK4蛋白、COX-2蛋白在食管鱗癌中的表達(dá)也呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。 6．CDK4蛋白表達(dá)和COX-2蛋白在食管鱗癌中表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，在38例CDK4蛋白陽(yáng)性的病例中有33例COX-2蛋白表達(dá)陽(yáng)性，在11例CDK4蛋白陰性的病例中有8例COX-2蛋白表達(dá)陰性。 7．NF-<,к> Bp50和p65蛋白在食管鱗癌中表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)， NF．<,к>

13、 Bp50和p65mKNA在食管鱗癌中表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。NF-<,к>Bp50蛋白和mRNA在食管鱗癌中表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。NF-<,к>Bp65蛋白和mRNA在食管鱗癌中表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。 結(jié)論 1．食管鱗癌組織中NF-<,к> B p50、p65蛋白及mRNA的陽(yáng)性率均高于正常食管粘膜。在癌旁不典型增生組織中NF-<,к> B p50、p65蛋白及mRNA的陽(yáng)性率逐漸增高

14、，提示NF-<.к> B蛋白及mRNA表達(dá)增高與食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。 2．NF-<,к> B p50、p65蛋白及mRNA的陽(yáng)性率均隨癌組織浸潤(rùn)深度的加深而明顯增高，在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組癌組織均明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組癌組織，表明了NF-κB D50、p65基因參與食管鱗癌的局部侵襲和轉(zhuǎn)移。 3．CDK4蛋白、COX-2蛋白在食管鱗癌的高表達(dá)與其發(fā)生和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移有關(guān)，其陽(yáng)性率隨癌組織分化程度的降低而增高，提示CDK4蛋白的表達(dá)與食管