ASC基因異常甲基化與胃癌相關(guān)性的研究.pdf

1、目的：
　　通過(guò)檢測(cè)ASC基因在胃組織中的甲基化狀態(tài)及其mRNA的表達(dá)情況，分析兩者與胃癌臨床病理特征之間的關(guān)系及兩者表達(dá)的相關(guān)性；通過(guò)去甲基化藥物處理胃癌細(xì)胞SGC7901，探討ASC基因甲基化狀態(tài)與其mRNA表達(dá)的相關(guān)性，闡明ASC基因在胃癌發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用和可能的機(jī)制，為腫瘤的防治尋找一個(gè)新的可能的靶點(diǎn)。
　　方法：1、通過(guò)甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)對(duì)組織中ASC啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)進(jìn)行檢測(cè)；

2、r>　　2、運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-PCR）對(duì)組織中ASC基因mRNA的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)；
　　3、用MSP和RT-PCR分別對(duì)5-aza-CdR處理前后胃癌細(xì)胞中ASC基因啟動(dòng)子區(qū)域甲基化狀態(tài)和mRNA的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。將該基因的甲基化水平與mRNA表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：1、50例胃癌組織中有16例檢測(cè)到甲基化，甲基化率為32％，100例非腫瘤胃組織12例出現(xiàn)了甲基化，甲基化率為12%。癌組織與非腫瘤胃組織的

3、甲基化率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；
　　2、胃癌組織中ASC基因甲基化狀態(tài)與患者年齡、性別、腫瘤大小、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、胃癌組織分型無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；
　　3、胃癌組織的ASC基因mRNA表達(dá)為0.893±0.361，而非腫瘤胃組織中ASC基因mRNA表達(dá)為(1.000±0.002)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.041)；
　　4、胃癌組織中ASC基因mRNA定量表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小、有無(wú)淋巴

4、結(jié)轉(zhuǎn)移、胃癌組織分型無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；
　　5、用Pfaffi法計(jì)算所得的數(shù)值大于l為基因表達(dá)陽(yáng)性，小于1為基因表達(dá)陰性。算得胃癌組織中ASC基因表達(dá)陽(yáng)性的有5例，其中未發(fā)生甲基化2例，發(fā)生部分甲基化2例，完全甲基化的1例；表達(dá)陰性的有45例，其中未發(fā)生甲基化32例，發(fā)生部分甲基化4例，完全甲基化的9例。ASC mRNA表達(dá)不同的組織中ASC基因的甲基化水平有差(P<0.05)；
　　6、未經(jīng)5-aza-CdR處

5、理的胃癌細(xì)胞株SGC7901內(nèi)，ASC基因啟動(dòng)子區(qū)域檢測(cè)為甲基化狀態(tài)；經(jīng)過(guò)5-aza-CdR藥物處理后的SGC7901細(xì)胞內(nèi)，ASC基因啟動(dòng)子區(qū)檢測(cè)為非甲基化狀態(tài)；未經(jīng)5-aza-CdR處理的胃癌細(xì)胞株SGC7901內(nèi)未檢測(cè)到ASC mRNA的表達(dá)，經(jīng)過(guò)5-aza-CdR藥物處理后的SGC7901細(xì)胞內(nèi)ASC mRNA重新得到表達(dá)。
　　結(jié)論：1、胃癌組織中ASC基因存在甲基化；
　　2、胃癌組織中ASC基因表達(dá)缺失或低下；