早期改良后的性激素替代療法對(duì)去卵巢家兔動(dòng)脈粥樣硬化的影響.pdf

1、背景： 當(dāng)今，在發(fā)達(dá)國(guó)家的絕經(jīng)后婦女中，心血管疾病已成為最主要的死亡原因，流行病學(xué)和臨床資料顯示：在絕經(jīng)早期的婦女（50～59歲）中應(yīng)用雌激素替代療法能夠預(yù)防心血管疾病的發(fā)生，但是長(zhǎng)期的雌激素替代療法能夠增加女性患子宮內(nèi)膜癌和乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)，盡管聯(lián)合性激素替代療法（雌+孕）能夠降低發(fā)生子宮內(nèi)膜增生或子宮內(nèi)膜癌的風(fēng)險(xiǎn)，但能夠增加患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)，前瞻性隨機(jī)雙盲安慰劑對(duì)照臨床試驗(yàn)婦女健康初始項(xiàng)目（woman's health initi

2、ative，WHI）的結(jié)果顯示：與安慰劑組相比，應(yīng)用聯(lián)合性激素替代療法的婦女發(fā)生深靜脈血栓事件的相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)是2.11（95％ CI1.58～2.82），而有深靜脈血栓事件病史的婦女的相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)4.91（95％ CI0.58～41.60）[1、2、3、4、5]。 在認(rèn)識(shí)到性激素替代療法的弊端以后，我們尋求一種更好的性激素替代療法，這種改良后的雌激素替代療法能夠帶來(lái)雌激素的保護(hù)作用，避免其帶來(lái)的副作用。雷洛昔芬是一類選擇性雌激素受體拮抗

3、劑（selective estrogen receptormodulator，SERM），具有獨(dú)特的選擇性作用特點(diǎn)，對(duì)乳腺和子宮組織顯示為雌激素受體拮抗劑，對(duì)骨骼和血脂為雌激素受體激動(dòng)劑；阿司匹林是被研究最深的抗血小板藥物，而且多年來(lái)它在抗血小板治療方案中處于核心地位。由此，我們從理論上推測(cè)：改良后的性激素替代療法（雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林）既能夠有雌激素對(duì)心血管系統(tǒng)的的保護(hù)作用，又能夠避免單純的雌激素療法帶來(lái)生殖系統(tǒng)癌癥和靜脈血栓事

4、件的副作用。目前，國(guó)內(nèi)外還沒有對(duì)這3種藥物合用進(jìn)行報(bào)道。 研究目的： 1.探討早期改良后的性激素替代療法與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系，是否優(yōu)于傳統(tǒng)的性激素替代療法。 2.探討改良后的雌激素替代療法對(duì)乳腺、子宮、骨骼的作用及與靜脈血栓的關(guān)系，是否優(yōu)于傳統(tǒng)的性激素替代療法。 材料與方法： 80只新西蘭大白兔被隨機(jī)分成8組（n=10），分別為對(duì)照組（A組）、雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組（B組）、雌激素+雷洛昔芬

5、組（C組）、雌激素組（D組）、雷洛昔芬組（E組）、雌激素+孕激素組（F組）、阿司匹林組（G組）和假手術(shù)組（H組）。在適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，用3％的戊巴比妥鈉靜脈麻醉，假手術(shù)組只打開腹腔，然后縫合腹壁，其余70只均去雙側(cè)卵巢，去卵巢手術(shù)后，各組兔均給予普通飼料喂養(yǎng)1周，然后給予1.5％的高膽固醇飼料喂養(yǎng)和藥物干預(yù)12周，藥物干預(yù)組的藥物劑量分別為：雌激素0.25mg/d，雷洛昔芬10mg/d，阿司匹林12.5mg/d，孕激素1mg/d。給藥1

6、2周后檢測(cè)血脂、雌激素、和單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）的水平和血小板聚集功能，取主動(dòng)脈根部5mm標(biāo)本進(jìn)行切片（橫切面）HE染色，觀察橫切面動(dòng)脈硬化病變的內(nèi)膜/中膜厚度比值；苦味酸天狼星紅染色，觀察斑塊內(nèi)膠原纖維的含量，免疫組化法半定量觀察橫切面斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞和基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）的陽(yáng)性率。其余部分從胸主動(dòng)脈起始部到腹主動(dòng)脈分叉處縱行剖開，油紅O染色，分析縱剖面斑塊面積及占主動(dòng)脈的面積比。取子宮并稱重，取乳腺組織，HE染

7、色，觀察乳腺腺腔面積比，用骨密度測(cè)量?jī)x測(cè)定骨密度。統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料用x±s表示，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示，多組間比較采用One-Way ANOVA方差分析，兩組間比較采用q檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1.假手組、雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組、雌激素+雷洛昔芬、雌激素組和雌激素+孕激素組的雌激素水平明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 2.雌激素+雷洛昔芬

8、+阿司匹林組、雌激素+雷洛昔芬和雌激素組的血清總膽固醇（TC）水平和低密度脂蛋白（LDL）明顯低于對(duì)照組（P<0.05），而高密度脂蛋白（HDL）和甘油三酯（TG）差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組、雌激素組及雌激素+孕激素組之間各項(xiàng)血脂指標(biāo)差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 3.對(duì)照組內(nèi)膜明顯增厚，雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組、雌激素+雷洛昔芬組和雌激素組可見內(nèi)膜稍增厚，與對(duì)照組比較有顯著差異性（P

9、<0.01），對(duì)照組的I/M比值明顯大于雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組、雌激素+雷洛昔芬、雌激素組和假手術(shù)組的I/M比值，它們間有顯著差異性（P<0.01）。油紅0染色顯示：假手術(shù)組可見脂質(zhì)沉積斑塊，對(duì)照組則為大面積脂質(zhì)沉積斑塊，雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組、雌激素+雷洛昔芬組和雌激素組與對(duì)照組有明顯差異（P<0.01），雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組、雌激素+雷洛昔芬組和雌激素組之間差異不顯著（P>0.05），雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組

10、和雌激素+孕激素組之間存在顯著差異性（P<0.05）。 4.對(duì)照組與雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組、雌激素+雷洛昔芬組、雌激素組雌激素+孕激素組血清單核細(xì)胞趨化蛋白-1的水平之間有顯著差異性（P<0.01），雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組、雌激素+雷洛昔芬、雌激素組、雌激素+孕激素組之間無(wú)顯著差異性（P>0.05）。 5.對(duì)照組巨噬細(xì)胞的含量明顯高于雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組、雌激素+雷洛昔芬組、雌激素組和雌激素+孕激素組

11、（P<0.01），雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組分別和雌激素組及雌激素+孕激素組都存在顯著差異性（P<0.01）。 6.對(duì)照組MMP-9的含量明顯高于雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組、雌激素+雷洛昔芬組、雌激素組和雌+孕組（P<0.01），雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組、雌激素+雷洛昔芬組、雌激素組和雌+孕組四組之間無(wú)顯著差異（P>0.05）。 7.雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組和雌激素組斑塊內(nèi)膠原纖維含量明顯高于對(duì)照組（P<0.

12、05），且雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組和雌激素組斑塊內(nèi)膠原纖維含量有顯著差異性（P<0.05）。 8.各組中兔的骨密度無(wú)顯著差異性（P>0.05）。 9.對(duì)照組各兔的子宮重量最小。雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組與雌激素組存在顯著差異性（P<0.01），雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組與雌激素+孕激素組存在顯著差異性（P<0.01）。 10.雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組的血小板聚集功能明顯低于雌激素+雷洛昔芬組、雌激素組

13、和雌激素+孕激素組（P<0.01）。 11.假手術(shù)組乳房正常發(fā)育，是乳腺腺腔面積比值最大的一組，對(duì)照組各兔的乳房萎縮，乳腺腺腔面積最小。雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林組與雌激素組、和雌激素+孕激素組存在顯著差異性（P<0.01）。 結(jié)論： 改良后的性激素替代療法（雌激素+雷洛昔芬+阿司匹林）能夠通過(guò)降低總膽固醇和低密度脂蛋白，降低血液中炎癥因子單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）的水平，從而降低斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞、基質(zhì)金屬