乙酰膽堿對人垂體腺瘤細胞增殖的抑制作用及其機理的初步研究.pdf

1、第四軍醫(yī)大學博士學位論文乙酰膽堿對人垂體腺瘤細胞增殖的抑制作用及其機理的初步研究姓名：遲素敏申請學位級別：博士專業(yè)：生理學指導教師：王復周朱運龍2001.6.1第四軍醫(yī)大學博士掌位論文用，是理解Ach影響垂體前葉細胞分泌功能的基礎，其結果不僅有助于充分認識垂體前葉的旁分泌網(wǎng)絡，而且，對于了解垂體腺瘤的發(fā)生、發(fā)展也將產(chǎn)生積極的影響。在體情況下，Ach主要在膽堿能神經(jīng)細胞的終末合成，并在神經(jīng)沖動到來時釋放，然后很快被酶水解或回攝，很難作遠距

2、離擴散a而實驗證明多種動物的正常垂體前葉細胞及腫瘤細胞都可以合成及分泌Ach，提示Ach能以自分泌或旁分泌的方式在垂體內(nèi)起作用。因此，人的正常垂體和垂體腺瘤內(nèi)是否存在合成Ach所必需的酶膽堿乙酰轉移酶(cholineacetyltransferase，CHAT)，Ach對垂體腺瘤細胞的增殖是否有影響，以及Ach通過何種途徑起作用等則是研究Ach對人的垂體和垂體腺瘤影響的關鍵所桎，)皤本實驗應用免疫組織化學、MTT和3HTdR參入法、流式

3、細胞儀檢測法、共聚焦顯微鏡檢測細胞【Ca2】i方法、TUNEL以及放免等方法研究了ChAT在人正常垂體和三種垂體腺瘤(催乳素瘤、生長激素瘤和無功瘤)的表達；觀察了Ach對三種垂體腺瘤細胞增殖和代謝的影響，并初步分析了其作用機制。／結果表明：1免疫組織化學方法顯示三種垂體腺瘤細胞中存在ChAT免疫陽性物質，ChAT免疫陽性物質存在于細胞的胞漿中。在人正常垂體前葉細胞中同樣也存在CILAT免疫陽性物質。這表明人正常垂體前葉和實驗所觀察的三種

4、垂體腺瘤細胞中具有合成Ach的關鍵酶。說明Ach可以在垂體前葉細胞內(nèi)和／或垂體腺瘤細胞內(nèi)合成并釋放，由于垂體前葉細胞表面存在著功能性的M型膽堿能受體，提示Ach可以在垂體前葉內(nèi)和／或垂體腺瘤內(nèi)以旁分泌或自分泌的形式起作用，影響著垂體前葉細胞的分泌功能及其細胞的增殖與分化。2采用MTT和3HTdR參入實驗表明，Ach能抑制三種垂體腺瘤細胞的增殖和DNA的合成，其抑制作用的程度與Ach的作用濃度有關，并呈劑量依賴效應(PO01)。此抑制作用