卵巢上皮性腫瘤中磷酸化STAT3和Ki67的表達(dá)及其意義.pdf

1、背景和目的：
　　卵巢惡性腫瘤的死亡率居女性生殖惡性腫瘤之首位,而卵巢上皮性癌(ovarian epithelial carcinoma,OEC)的發(fā)病率占所有卵巢惡性腫瘤的80％左右,由于目前缺乏切實(shí)可行的篩查手段,加之癥狀的隱匿性,早期診斷困難,一旦發(fā)現(xiàn)多為晚期。盡管手術(shù)技術(shù)不斷進(jìn)步,新的化療藥物不斷涌現(xiàn),但其5年生存率仍徘徊在30％左右,預(yù)后極差。
　　目前卵巢癌的發(fā)病機(jī)制仍不清楚,已知卵巢癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多基因參與

2、的多階段過程。某一個(gè)基因的異常變化可能影響腫瘤的某些生物學(xué)特性。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,癌基因及其產(chǎn)物的檢測在臨床上對(duì)腫瘤的發(fā)病機(jī)制、惡性程度、轉(zhuǎn)移能力以及評(píng)估預(yù)后提供了科學(xué)客觀的資料。因此,進(jìn)一步研究卵巢癌惡性生物學(xué)行為的影響因素及相關(guān)機(jī)制,尋找更有效的早期診斷、評(píng)價(jià)預(yù)后的方法和指標(biāo),以及探索更有效的阻斷、控制腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移的新途徑,均具有重要的理論及實(shí)踐意義,亦是目前腫瘤生物學(xué)領(lǐng)域研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3(signa

3、l transducerand activator of transcription3,STAT3)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路直接影響細(xì)胞的增殖、分化及凋亡過程,該通路活化可導(dǎo)致細(xì)胞異常增殖和惡性轉(zhuǎn)化,被定義為癌基因。STAT3分子主要通過酪氨酸磷酸化而被激活,主要被JAK激酶激活。STAT3單體通過SH2結(jié)構(gòu)域與另一STAT3分子磷酸化的酪氨酸殘基相互作用形成二聚體進(jìn)入細(xì)胞核調(diào)節(jié)靶基因轉(zhuǎn)錄。STAT3是EGFR,IL-6/JAK,Src等多個(gè)致癌性

4、酪氨酸激酶信號(hào)通道匯聚的焦點(diǎn),在多種腫瘤細(xì)胞和組織中都有過度激活。針對(duì)STAT信號(hào)上游途徑中酪氨酸激酶如JAK,Src和EGFR的抑制劑已經(jīng)研制成功,部分已進(jìn)入臨床試驗(yàn),而應(yīng)用酪氨酸激酶抑制劑治療卵巢癌的實(shí)驗(yàn)研究也已經(jīng)開始。Ki67作為標(biāo)記細(xì)胞增殖狀態(tài)的抗原,近年已廣泛用于研究腫瘤的生物學(xué)行為,是目前最常用的增殖標(biāo)記。同時(shí)研究Ki67可以進(jìn)一步了解STAT3與卵巢上皮性癌細(xì)胞增殖的關(guān)系。
　　本研究應(yīng)用免疫組化SP(strepta

5、vidin-perosidase)法檢測p-STAT3蛋白和Ki67蛋白在正常卵巢組織及良、惡性卵巢上皮性腫瘤組織中的表達(dá)情況并分析兩者的相關(guān)性,闡明兩者的表達(dá)與卵巢上皮性癌生物學(xué)行為之間的關(guān)系,探討p-STAT3和Ki67與卵巢上皮性癌發(fā)生機(jī)制的關(guān)系,為卵巢上皮性癌的診斷、判斷預(yù)后和改進(jìn)治療方法提供理論依據(jù)。
　　材料與方法：
　　1.材料收集鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院和河南省腫瘤醫(yī)院自2007年7月~2008年5月行手術(shù)切除的

6、卵巢組織共90例,患者平均年齡50歲(32~68歲)。其中卵巢上皮性癌40例(漿液性25例,粘液性15例),卵巢上皮性瘤30例(漿液性20例,粘液性10例),正常卵巢組織20例,以上標(biāo)本的診斷均經(jīng)病理科醫(yī)師核實(shí),根據(jù)分化程度,卵巢上皮性癌組織分級(jí)為:中高分化19例,低分化21例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移28例;按照FIGO國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟診斷標(biāo)準(zhǔn),Ⅰ期9例,Ⅱ期10例,Ⅲ期15例和Ⅳ期6例。所有病例術(shù)前均未接受放、化療及免疫治療。

7、
　　2.方法采用免疫組化SP法檢測p-STAT3蛋白和Ki67蛋白在正常卵巢上皮性組織及良、惡性卵巢上皮性腫瘤組織中的表達(dá)情況。
　　3.結(jié)果判定根據(jù)染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞數(shù)量雙評(píng)分法進(jìn)行半定量積分。
　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析,差異性檢驗(yàn)采用χ~2檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性檢驗(yàn),以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1.p-STAT3蛋白陽性表達(dá)于胞核或胞

8、漿,在正常卵巢上皮組織和卵巢上皮性瘤組織中陽性表達(dá)主要在胞漿,在卵巢上皮性癌組織中陽性表達(dá)主要在胞核。p-STAT3蛋白在正常卵巢上皮組織、卵巢上皮性瘤和卵巢上皮性癌組織中的陽性表達(dá)率分別為20.0％,30.00％和80.00％(χ~2=26.400,P<0.05),三組中的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在卵巢上皮性癌中,p-STAT3蛋白的陽性表達(dá)在Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期中的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在不同組織分級(jí)中的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

9、中的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在不同年齡組中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在不同病理類型中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.Ki67蛋白的陽性表達(dá)主要在胞核。Ki67在正常卵巢上皮組織、卵巢上皮性瘤和卵巢上皮性癌組織中的陽性表達(dá)率分別為15.00％,30.00％和77.50％(χ~2=26.575,P<0.001),Ki67在三組中的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在卵巢上皮性癌中,Ki67蛋白的表達(dá)在Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期中的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在不同組織分級(jí)中的差異有

10、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;不同年齡組中的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在不同病理類型中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.p-STAT3和Ki67在卵巢上皮性癌組織中表達(dá)的相關(guān)性分析顯示,p-STAT3蛋白和Ki67蛋白的表達(dá)成正相關(guān)(r=0.813,P<0.001)。
　　結(jié)論：
　　1.p-STAT3蛋白過度激活可能導(dǎo)致卵巢上皮性細(xì)胞增殖失控、惡性轉(zhuǎn)化,促進(jìn)卵巢上皮性癌的發(fā)生發(fā)展。
　　2.p-STAT3