慢病毒介導(dǎo)RNA干擾Cdh1的表達(dá)對(duì)大鼠脊髓損傷的修復(fù)作用.pdf

1、目的：觀察大鼠脊髓損傷后皮層體感運(yùn)動(dòng)區(qū)Cdh1 mRNA的表達(dá)變化，探討慢病毒介導(dǎo)RNA干擾Cdh1的表達(dá)對(duì)脊髓損傷修復(fù)的作用。
　　 方法：20只雄性成年健康SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和手術(shù)組（1wk組、2wk組），手術(shù)組采用Allen氏法在T10-T11建立脊髓打擊損傷模型，正常對(duì)照組僅咬除T10椎板。1wk、2wk后分別取大鼠前囟后體感運(yùn)動(dòng)皮層區(qū)域，然后提取組織總RNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)Cdh1 mRNA的表達(dá)變

2、化。另30只雄性成年SD大鼠隨機(jī)分為生理鹽水注射組（A組，n=10），空慢病毒注射組（B組,n=10）和重組慢病毒注射組（C組，n=10）。3組均采用改良Allen氏法建立脊髓打擊損傷模型，術(shù)后1wk分別在大鼠前囟后體感運(yùn)動(dòng)皮層區(qū)注射生理鹽水、空慢病毒和重組慢病毒，注射10d后每組取5只采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)法檢測(cè)Cdh1 mRNA的表達(dá)并且在術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)大鼠進(jìn)行運(yùn)動(dòng)功能采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB

3、)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估，術(shù)后第6wk用同樣的方法在原皮層區(qū)域注射10％BDA-TR（Biotinylated Dextran Amine-Texas Red）。術(shù)后8wk處死并用4％多聚甲醛灌注固定取脊髓損傷區(qū)域作冰凍連續(xù)縱切片,熒光顯微鏡下直接觀察。
　　 結(jié)果：大鼠脊髓損傷后1wk和2wk前囟后體感運(yùn)動(dòng)皮層區(qū)域的Cdh1 mRNA的表達(dá)均高于對(duì)照組（P<0.05），注射藥物后C組Cdh1 mRNA的表達(dá)低于A組及B組（P<0．05）