黃曲霉毒素誘導(dǎo)的小鼠肝癌相關(guān)蛋白的研究.pdf

1、為了深入了解黃曲霉毒素B1對(duì)小鼠肝臟蛋白的影響，本研究之前我們已經(jīng)采用雙向電泳及質(zhì)譜分析等方法來分析不同濃度的黃曲霉毒素B1對(duì)小鼠肝臟蛋白的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)有35個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)變化差異顯著，分析其中新出現(xiàn)和明顯上調(diào)的5個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)以及缺失的和明顯下調(diào)的7個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)。其中有5個(gè)蛋白屬于引發(fā)小鼠肝臟發(fā)生病變甚至是癌變的蛋白，7個(gè)蛋白屬于參與小鼠肝臟能量與物質(zhì)代謝的蛋白，這些蛋白對(duì)小鼠肝臟都有一定的影響。因而推測(cè)，黃曲霉毒素B1可能通過作用于這12個(gè)

2、蛋白質(zhì)而進(jìn)一步影響小鼠肝臟，使其發(fā)生病變甚至是癌變。 為排除上述實(shí)驗(yàn)中可能發(fā)生的錯(cuò)誤，并在轉(zhuǎn)錄水平上探索這些基因的表達(dá)情況，我們利用熒光定量PCR對(duì)黃曲霉毒素誘導(dǎo)后的小鼠肝臟 atp5b、idh3a和prxⅡ三個(gè)基因的mRNA量進(jìn)行了相對(duì)定量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)atp5b先增后減，idh3a有增加的趨勢(shì)，prxⅡ則近似增加，這與雙向電泳的結(jié)果一致。隨后，我們將atp5b、idh3a和prxⅡ這三個(gè)基因構(gòu)建到原核表達(dá)載體pET28a上，并轉(zhuǎn)