脂氧素在大鼠脛骨癌痛中的作用及黃芩素鎮(zhèn)痛機制研究.pdf

1、癌痛即惡性腫瘤引起的疼痛。因其程度劇烈，難以忍受，嚴重影響了患者正常工作和生活。其中由原發(fā)性骨肉瘤、乳腺癌、前列腺癌或肺癌等腫瘤轉(zhuǎn)移至骨所致的疼痛最為常見。目前臨床用于鎮(zhèn)痛的藥物因成癮性或其他毒副作用嚴重限制了其使用，因此研究并闡明骨癌痛的病理機制以尋求安全有效緩解疼痛的臨床治療藥物，提高患者生存質(zhì)量勢在必行。
　　骨癌痛具有獨特復雜的病理機制，至今未能完全闡明。近年來，結(jié)合國內(nèi)外及我們實驗室前期工作表明，骨癌痛的發(fā)生不同于單純的

2、炎癥痛或神經(jīng)痛。在脛骨癌痛大鼠模型上，表現(xiàn)為大鼠脊髓背角膠質(zhì)細胞顯著激活增生，脊髓中各種炎性細胞因子如白介素-1beta(Interleukin-1β，IL-1β)、白介素-6（Interleukin-6，IL-6）、腫瘤壞死因子-alfa(Tumor necrosis factor Alfa，TNF-α)表達上調(diào)，被稱之為神經(jīng)炎癥(Neuroinflammation)，與骨癌痛的發(fā)生密切相關。此外在對炎癥痛、神經(jīng)痛和骨癌痛三種病理性疼

3、痛的相關機制研究中發(fā)現(xiàn)，在骨癌痛模型上脊髓強啡肽(Dynorphin，DYN)陽性神經(jīng)元表達顯著增加，抑制其表達可緩解骨癌痛，提示強啡肽與骨癌痛的發(fā)生密切相關。
　　生理狀態(tài)下，體內(nèi)存在一整套精密的炎癥調(diào)控系統(tǒng)，通過動態(tài)調(diào)節(jié)體內(nèi)抗炎和致炎兩種力量，維持內(nèi)穩(wěn)態(tài)平衡。在急性炎癥期，機體通過產(chǎn)生各種抗炎脂類介質(zhì)如脂氧素(Lipoxins，LXs)、Resolvins、Protectins等抑制炎性因子產(chǎn)生，促進炎癥消退。當機體內(nèi)源性產(chǎn)生

4、的抗炎介質(zhì)不足以抵制入侵致炎因子，即轉(zhuǎn)變?yōu)槁匝装Y，遷延不愈，導致疾病的發(fā)生。脂氧素作為機體可內(nèi)源性產(chǎn)生的一類抗炎脂類介質(zhì)引起廣泛關注。脂氧素是一類來源于花生四烯酸(Arachidonic acid，AA)經(jīng)一系列脂氧合酶（Lipoxygenases，LOs）代謝產(chǎn)生的具有抗炎和促炎癥消退的脂類介質(zhì)，被譽為炎癥過程的“剎車信號”。根據(jù)其生成途徑及參與調(diào)節(jié)的酶不同，主要包括脂氧素A4(Lipoxin A4，LXA4)、脂氧素B4(Lipo

5、xin B4，LXB4)、阿司匹林誘生型脂氧素A4(Aspirin Triggered Lipoxin A4，ATL)和15-epi-LXB4。脂氧素合成后主要通過與脂氧素受體（Lipoxin A4 receptor，ALX）結(jié)合，發(fā)揮抗炎和促炎癥消退的作用。研究表明:預先給予LXA4可顯著抑制脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）誘導的小鼠巨噬細胞株RAW264.7相關炎性因子的釋放和大鼠肺泡毛細血管內(nèi)皮細胞炎癥;在足

6、底注射角叉菜膠引起的大鼠炎癥痛模型中，系統(tǒng)及鞘內(nèi)給予脂氧素及其類似物可顯著緩解疼痛，并抑制相關信號通路激活;在慢性壓迫性背根神經(jīng)節(jié)損傷(Chronic Compression of DRG，CCD)造成的大鼠神經(jīng)痛模型上，鞘內(nèi)給予LXA4可緩解神經(jīng)痛并抑制炎性因子產(chǎn)生。綜上所述，脂氧素及其類似物在炎癥痛及神經(jīng)痛模型上均能發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛的作用，但是關于其在骨癌痛中的作用尚未見相關報道。因此探究脂氧素及其類似物是否能夠參與緩解骨癌痛及其相關分

7、子機制是本課題的研究內(nèi)容之一。
　　脂氧素主要通過三種途徑合成:1）通過細胞間的相互作用，主要是多形核粒細胞(Polymorphonuclear leukocyte，PMN)與血管內(nèi)皮細胞或氣道上皮細胞在15-LO和5-LO的參與下生成;2）通過細胞與血小板間的相互作用，多形核粒細胞和血小板在12-LO、5-LO的參與下合成;3）通過阿司匹林誘導，使環(huán)氧酶-2(COX-2)乙?；?-LO的催化下生成。其中脂氧合酶5-LO、12

8、-LO和15-LO與脂氧素的生成密切相關。但是這些脂氧合酶不但參與機體內(nèi)源性抗炎脂類介質(zhì)的產(chǎn)生，與機體內(nèi)源性致炎脂類介質(zhì)如白細胞三烯、前列腺素的合成也有密切聯(lián)系。5-LO是白細胞三烯合成所必須的關鍵酶。足底注射三種脂氧合酶抑制劑可通過抑制c-Fos表達緩解足底注射角叉菜膠引起的大鼠炎癥痛，上調(diào)12/15-LO活動誘發(fā)p-ERK顯著激活。以上研究表明，脂氧合酶作為雙刃劍，參與了機體內(nèi)源性抗炎和致炎脂類介質(zhì)的產(chǎn)生，其異常表達可能會打破兩者間

9、平衡導致疾病發(fā)生。
　　中醫(yī)藥是一個偉大的寶庫，尋找具有抗炎鎮(zhèn)痛作用的中藥單體化合物并研究其對癌痛的鎮(zhèn)痛作用，具有重要理論與實踐意義。我們注意到對脂氧合酶具有調(diào)節(jié)作用的一種來自中藥黃芩的抗炎物質(zhì):黃芩素(Baicalein，BE)。黃芩素是12/15-LO外源性抑制劑，是提取自中藥黃芩的一種黃酮類重要有效成分，分子式C15H10O5，相對分子質(zhì)量270.24。黃芩，苦、寒，歸肺、脾、胃、大腸、小腸經(jīng)，具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、

10、降血壓等作用。臨床常用于濕熱痞滿、瀉痢、黃疸、癰腫瘡毒等。藥理研究表明，黃芩素具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌、抗病毒、調(diào)節(jié)免疫等作用，主要與其抑制炎性因子表達、阻斷MEK-ERK信號通路、降低NF-κB激活等相關。
　　12/15-LO是參與內(nèi)源性抗炎和致炎脂類介質(zhì)合成的關鍵酶，那么在骨癌痛大鼠模型上，脂氧合酶的表達是否會發(fā)生變化？外源性給予黃芩素能否發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛作用？對內(nèi)源性脂氧合酶有何影響？其發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛的具體分子機制是什么？這是本課題研

11、究的另一內(nèi)容。
　　綜上所述，本課題擬在大鼠脛骨癌痛模型上，從行為學到形態(tài)學等不同方面，采用von-FreyHair、Real-Time PCR、免疫熒光法和Western Blot技術，開展下列研究:1）觀察脂氧素及其類似物在骨癌痛大鼠中的作用及相關機制;2）觀察黃芩素對大鼠骨癌痛的影響、脂氧合酶變化及相關分子機制。
　　實驗結(jié)果如下:
　　1.脂氧素及其類似物提高骨癌痛大鼠機械痛閾
　　1.1骨癌痛大鼠模型建

12、立及評價
　　大鼠隨機分成三組:正常組(Naive)、給予PBS的假手術組(Sham)和給予腫瘤細胞的模型組(Cancer)。用von-Frey Hair采用up-and-down方法測定大鼠機械痛閾(PawWithdrawal Threshold，PWT)。結(jié)果顯示:從造模后第三天開始，與Naive組相比，Cancer組術側(cè)PWT顯著降低，出現(xiàn)痛覺過敏，伴隨體重下降。X光片及脛骨病理切片也可看到顯著骨質(zhì)破壞。由于骨癌痛大鼠在后期

13、表現(xiàn)為顯著的惡病質(zhì)，伴隨嚴重的骨質(zhì)破壞導致拖曳步態(tài)，不利于分子生物學指標檢測及痛行為的測定。因此選擇造模后痛閾穩(wěn)定且生理狀態(tài)良好的術后七到十一天作為主要干預時間點。
　　1.2觀察鞘內(nèi)給予脂氧素及其類似物對正常大鼠機械痛閾影響
　　將大鼠隨機分為五組:Naive、Naive+NS、Naive+LXA40.1μg、Naive+LXB40.1μg和Naive+ATL0.1μg組。測定基礎痛閾后鞘內(nèi)給藥，在給藥后2、4、6小時測痛

14、。結(jié)果顯示:與Naive組相比，鞘內(nèi)給予NS、LXA4、LXB4或ATL對正常大鼠的機械痛閾無顯著影響。
　　1.3觀察鞘內(nèi)給予脂氧素及其類似物對骨癌痛大鼠機械痛閾影響
　　造模后，大鼠隨機分成四組:Cancer+NS、Cancer+LXA40.1μg、 Cancer+LXB40.1μg和Cancer+ATL0.1μg組。造模后第七天，測痛后鞘內(nèi)給藥，在給藥后2、4、6小時測痛。結(jié)果顯示:與Cancer+NS組比較，給予LX

15、A4、LXB4或ATL后均可顯著提高骨癌痛大鼠機械痛閾，并以ATL效果最為顯著。因此在接下來的實驗中，以ATL為主，進一步探究其對骨癌痛大鼠機械痛閾影響及相關機制。
　　小結(jié):鞘內(nèi)給予脂氧素及其類似物可顯著提高骨癌痛大鼠機械痛閾，以ATL作用最為顯著，但對正常大鼠機械痛閾無顯著影響。
　　2.外源性給予ATL通過ALX提高骨癌痛大鼠機械痛閾
　　2.1 ALX在骨癌痛大鼠脊髓中的表達和分布
　　將大鼠隨機分成三組

16、:Naive、Sham和Cancer組。造模后第十一天，將三組大鼠分成兩部分:一部分灌流取材，采用免疫熒光雙標法結(jié)合激光共聚焦顯微鏡掃描觀察，檢測神經(jīng)元標記物NeuN、星形膠質(zhì)細胞標記物GFAP、小膠質(zhì)細胞標記物CD11b和脂氧素受體標記物ALX在大鼠脊髓背角的表達情況;另一部分新鮮取材，采用WesternBlot技術檢測大鼠脊髓脂氧素受體在蛋白水平的表達變化。免疫熒光法結(jié)果表明:與Naive組相比，在Cancer組，星形膠質(zhì)細胞標記物

17、GFAP和小膠質(zhì)細胞標記物CD11b在骨癌痛大鼠脊髓背角免疫反應陽性信號光密度顯著增強，脂氧素受體標記物ALX主要與星形膠質(zhì)細胞標記物GFAP共標，少量與神經(jīng)元標記物NeuN共標，與小膠質(zhì)細胞標記物CD11b則沒有共標;Western Blot檢測結(jié)果顯示:與Naive組相比，在Cancer組脊髓脂氧素受體的蛋白表達水平?jīng)]有顯著改變。
　　2.2 ATL通過ALX提高骨癌痛大鼠機械痛閾
　　2.2.1鞘內(nèi)給予ALX拮抗劑BO

18、C-2對骨癌痛大鼠機械痛閾無顯著影響造模后，將大鼠隨機分成四組:Cancer+DMSO、Cancer+BOC-210μg、 Cancer+BOC-250μg和Cancer+BOC-2100μg組。造模后第十一天，測痛后鞘內(nèi)給藥，在給藥后1、2、3、4、6小時測痛。結(jié)果顯示:與Cancer+DMSO組相比，鞘內(nèi)給予不同劑量BOC-2對骨癌痛大鼠機械痛閾無顯著影響。因此在下一步實驗采用100μg的BOC-2觀察其對ATL鎮(zhèn)痛作用的影響。

19、r>　　2.2.2鞘內(nèi)給予ALX拮抗劑BOC-2可拮抗ATL對骨癌痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用造模后，將大鼠隨機分成四組:Cancer+DMSO、Cancer+BOC-2100μg、Cancer+ATL0.1μg和Cancer+BOC-2100μg+ATL0.1μg組。造模后第十一天，測痛后鞘內(nèi)給藥，在給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、6小時測痛。結(jié)果顯示:與Cancer+DMSO組相比，Cancer+BOC-2100μg組對骨癌痛大鼠機械痛閾

20、沒有影響，Cancer+ATL0.1μg組可顯著緩解骨癌痛，但Cancer+BOC-2100μg+ ATL0.1μg組則與Cancer+DMSO組無差異。提示:BOC-2可拮抗ATL緩解骨癌痛的作用。
　　2.3鞘內(nèi)給予不同劑量ATL均可提高骨癌痛大鼠機械痛閾造模后，將大鼠隨機分為四組:Cancer+NS、Cancer+ATL0.01μg、 Cancer+ATL0.1μg和Cancer+ATL0.15μg組。造模后第十一天，測痛后

21、鞘內(nèi)給藥，在給藥后2、4、6、8、12小時測痛。結(jié)果顯示:與Cancer+NS組相比，給予不同劑量ATL均可緩解骨癌痛，并且隨著劑量增加，鎮(zhèn)痛效應增強，鎮(zhèn)痛時程也有所延長。
　　2.4鞘內(nèi)給予ATL和嗎啡對骨癌痛大鼠鎮(zhèn)痛作用的比較
　　造模后，將大鼠隨機分成四組:Cancer+NS、Cancer+Morphine0.1μg、Cancer+Morphine5μg和Cancer+ATL0.1μg組。造模后第十一天，測痛后鞘內(nèi)給藥

22、，并在給藥后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、5、6小時測痛。結(jié)果顯示:與Cancer+NS組相比，鞘內(nèi)給予5μg嗎啡鎮(zhèn)痛效果較強;鞘內(nèi)給予0.1μg ATL和嗎啡均可緩解骨癌痛，其中嗎啡出現(xiàn)鎮(zhèn)痛高峰較早，但是ATL作用更為持久。
　　2.5尾靜脈給予不同劑量ATL提高骨癌痛大鼠機械痛閾
　　造模后，將大鼠隨機分成三組:Cancer+NS、Cancer+ATL10μg/kg和Cancer+ATL40μg/kg組。造模后

23、第十一天，測痛后尾靜脈給藥，并在給藥后1、2、3、4、6、8、12小時測痛。結(jié)果顯示:與Cancer+NS組相比，系統(tǒng)給予不同劑量ATL均能緩解骨癌痛，并且以40μg/kg的大劑量組鎮(zhèn)痛效果更為顯著。
　　小結(jié):與對照組相比，在模型組脂氧素受體表達無顯著改變;脂氧素受體在脊髓背角主要分布于星形膠質(zhì)細胞，少量分布于神經(jīng)元;在模型組大鼠脊髓背角星形膠質(zhì)細胞標記物GFAP和小膠質(zhì)細胞標記物CD11b表達顯著增加，但是脂氧素受體標記物AL

24、X沒有顯著改變。鞘內(nèi)給予脂氧素受體拮抗劑BOC-2可拮抗ATL緩解骨癌痛，提示ATL發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用是通過ALX。鞘內(nèi)及尾靜脈給予不同劑量ATL均能緩解骨癌痛，隨劑量增加，鎮(zhèn)痛效果隨之增強;與鞘內(nèi)給予相同劑量嗎啡相比，ATL鎮(zhèn)痛作用更為持久。
　　3.ATL提高骨癌痛大鼠機械痛閾的相關機制研究
　　3.1鞘內(nèi)給予ATL抑制骨癌痛大鼠脊髓炎性細胞因子表達
　　將大鼠隨機分成三組:Naive、Cancer+NS和Cancer+

25、ATL0.1μg組。造模后第十一天，鞘內(nèi)給藥，給藥后2小時，動物新鮮取材，選取脊髓L4-L6節(jié)段，進行Real-TimePCR實驗。觀察大鼠脊髓炎性細胞因子IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表達變化。結(jié)果顯示:與Naive組相比，在Cancer+NS組IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表達上調(diào)。給予ATL后抑制IL-1β和TNF-α mRNA的表達。
　　3.2鞘內(nèi)給予ATL抑制骨癌痛大鼠脊髓MAPK信號通路激活

26、r>　　大鼠造模后隨機分成五組:Naive、Sham、Cancer、Cancer+NS和Cancer+ATL0.1μg組。造模后第十一天，鞘內(nèi)給藥，給藥后兩小時，動物新鮮取材，選取脊髓L4-L6節(jié)段，進行Western Blot實驗。觀察脊髓中p-ERK、p-p38、p-JNK、p-STAT3、SOCS1、SOCS2和SOCS3表達變化。實驗結(jié)果表明:1）與Naive組相比，在Cancer組p-ERK、p-p38、p-JNK和p-STA

27、T3表達上調(diào)，SOCS1、SOCS2和SOCS3表達無顯著改變;2）與Cancer+NS組相比，給予ATL后p-ERK、p-p38和p-JNK的上調(diào)被抑制，但p-STAT3表達無顯著改變。
　　3.3鞘內(nèi)給予ATL抑制骨癌痛大鼠脊髓前強啡肽原mRNA上調(diào)將大鼠隨機分成三組:Naive、 Cancer+NS和Cancer+ATL0.1μg組。造模后第十一天，鞘內(nèi)給藥，給藥后2小時，動物新鮮取材，選取脊髓L4-L6節(jié)段，采用高通量Re

28、al-Time PCR檢測脊髓中前強啡肽原(Preprodynorphin，PPD)mRNA表達變化。結(jié)果顯示:與Naive組相比，在Cancer+NS組，PPD mRNA的表達上調(diào)，給予ATL后可抑制其上調(diào)。
　　3.4鞘內(nèi)給予ATL抑制骨癌痛大鼠脊髓脂氧合酶5-LO和15-LO表達大鼠造模后隨機分成五組:Naive、Sham、Cancer、Cancer+NS和Cancer+ATL0.1μg組。造模后第十一天，鞘內(nèi)給藥，給藥后兩

29、小時，動物新鮮取材，選取脊髓L4-L6節(jié)段，進行Western Blot實驗。結(jié)果表明:1）與Naive組相比，在Cancer組大鼠脊髓脂氧合酶5-LO、12-LO和15-LO表達上調(diào);2）與Cancer+NS組相比，給予ATL后，可抑制骨癌痛大鼠脊髓脂氧合酶5-LO和15-LO的表達，但是對12-LO的表達無顯著影響。
　　小結(jié):在骨癌痛大鼠模型上，脊髓炎性細胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表達增加;MAPK和S

30、TAT3信號通路磷酸化水平升高;脊髓前強啡肽原mRNA表達升高;脊髓脂氧合酶5-LO、12-LO和15-LO的表達增加。鞘內(nèi)給予ATL可抑制骨癌痛大鼠脊髓炎性細胞因子IL-1β和TNF-αmRNA表達上調(diào);抑制MAPK信號通路磷酸化;抑制脊髓前強啡肽原mRNA表達和脂氧合酶5-LO、15-LO表達。
　　4.黃芩素對骨癌痛大鼠機械痛閾影響及相關機制研究
　　4.1系統(tǒng)及鞘內(nèi)給予黃芩素對正常大鼠機械痛閾無顯著影響
　　將

31、大鼠隨機分成四組:Naive+DMSO i.t.、Naive+BE100μg/i.t.、Naive+DMSO i.p.和Naive+BE300 mg/kg/i.p.組。在給藥后0.5、1、2、3、4、6小時測痛。結(jié)果表明:與對照組相比，系統(tǒng)及鞘內(nèi)給予黃芩素對正常大鼠機械痛閾無顯著影響。
　　4.2鞘內(nèi)及系統(tǒng)給予黃芩素可提高骨癌痛大鼠機械痛閾
　　4.2.1鞘內(nèi)給予黃芩素可提高骨癌痛大鼠機械痛閾
　　大鼠造模后隨機分成四

32、組:Cancer+DMSO、Cancer+BE10μg、Cancer+BE50μg和Cancer+BE100μg組。造模后第十一天，測痛后鞘內(nèi)給藥。在給藥后0.5、1、2、3、4、6小時測痛。結(jié)果表明:鞘內(nèi)給予100μg黃芩素可緩解骨癌痛，持續(xù)至給藥后4小時。
　　4.2.2系統(tǒng)給予黃芩素可提高骨癌痛大鼠機械痛閾
　　大鼠造模后隨機分成三組:Cancer+DMSO、Cancer+BE150 mg/kg和Cancer+BE30

33、0 mg/kg組。造模后第十一天，測痛后腹腔給藥。在給藥后0.5、1、2、3、4、6小時測痛。結(jié)果表明:在給藥后兩小時，給予300 mg/kg黃芩素可緩解骨癌痛。
　　4.3黃芩素提高骨癌痛大鼠機械痛閾的相關機制研究
　　4.3.1鞘內(nèi)給予黃芩素抑制骨癌痛大鼠脊髓炎性細胞因子表達
　　將大鼠隨機分成三組:Naive、Cancer+DMSO和Cancer+BE100μg組。造模后第十一天，鞘內(nèi)給藥，給藥后兩小時新鮮取材，

34、選取脊髓L4-L6節(jié)段，用Real-Time PCR檢測大鼠脊髓炎性細胞因子IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表達變化。結(jié)果表明:與Naive組相比，在Cancer+DMSO組，脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表達顯著上調(diào)。給予黃芩素后可抑制IL-6和TNF-αmRNA表達上調(diào)。
　　4.3.2鞘內(nèi)給予黃芩素對骨癌痛大鼠脊髓相關信號通路的影響
　　大鼠造模后隨機分成兩組:Cancer+DMSO和Canc

35、er+BE100μg組。造模后第十一天，鞘內(nèi)給藥。給藥后2小時，動物新鮮取材，選取脊髓L4-L6節(jié)段，用Western Blot技術檢測大鼠脊髓磷酸化MAPK和STAT3信號通路表達變化。結(jié)果顯示:與Cancer+DMSO組相比，給予黃芩素后可抑制p-p38和p-JNK的激活，但對p-ERK和p-STAT3表達無顯著影響。
　　4.3.3鞘內(nèi)給予黃芩素抑制骨癌痛大鼠脊髓脂氧合酶5-LO的表達大鼠分組及干預同上，用Western B

36、lot技術檢測大鼠脊髓脂氧合酶5-LO、12-LO和15-LO表達變化。結(jié)果顯示:與Cancer+DMSO組相比，給予黃芩素后可抑制脂氧合酶5-LO的表達，但對脂氧合酶12-LO和15-LO表達無顯著影響。
　　小結(jié):在骨癌痛大鼠，鞘內(nèi)及系統(tǒng)給予黃芩素可緩解骨癌痛，對正常大鼠機械痛閾無顯著影響。在骨癌痛大鼠脊髓炎性細胞因子IL-1β、 IL-6和TNF-αmRNA表達上調(diào);MAPK、STAT3信號通路磷酸化水平升高;脊髓脂氧合酶5

37、-LO、12-LO和15-LO表達上調(diào)。鞘內(nèi)給予黃芩素后，可抑制骨癌痛大鼠脊髓炎性細胞因子IL-1β和TNF-α mRNA表達上調(diào)，抑制p-p38和p-JNK的激活，抑制脂氧合酶5-LO表達上調(diào)。
　　綜上所述，本研究提示:
　　1.鞘內(nèi)給予脂氧素及其類似物可提高骨癌痛大鼠機械痛閾，并以ATL效果更好，對正常大鼠機械痛閾無顯著影響;
　　2.脂氧素受體在脊髓背角主要分布于星形膠質(zhì)細胞，少量分布于神經(jīng)元，與對照組相比在模

38、型上受體的表達無顯著改變;鞘內(nèi)預先給予脂氧素受體拮抗劑BOC-2可阻斷ATL緩解骨癌痛的作用，提示ATL發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用是通過與脂氧素受體結(jié)合;鞘內(nèi)及系統(tǒng)給予不同劑量ATL均可緩解骨癌痛;
　　3.鞘內(nèi)給予ATL可抑制骨癌痛大鼠脊髓炎性細胞因子IL-1β和TNF-αmRNA的表達，抑制p-ERK、p-p38和p-JNK激活，抑制與中樞敏化密切相關的內(nèi)阿片肽前強啡肽原mRNA表達，抑制脊髓脂氧合酶5-LO和12-LO表達。提示ATL可能