Cuta基因敲除小鼠的構建與表型研究.pdf

1、阿爾茨海默癥(Alzheimer's disease，AD)的一個主要病理特征是神經(jīng)元外β-amyloid(Aβ)聚集形成的淀粉樣斑，Aβ級聯(lián)假說是AD發(fā)病機制的主流學說。β-淀粉樣蛋白前體蛋白(β-Amyloid Precursor Protein，APP)經(jīng)β-分泌酶(β-site APPcleaving enzyme1，BACE1)和γ-分泌酶的順序剪切后生成大量的Aβ40和少量的Aβ42，但Aβ，特別是Aβ42具有神經(jīng)毒性，可以

2、導致神經(jīng)退行死亡。BACE1是APP水解的限速酶。我們實驗室之前的研究發(fā)現(xiàn)人源銅相關蛋白（CutAdivalent cation tolerance homolog of E.coli，CUTA）通過與BACE1的相互作用，介導其在胞內的定位，從而調控APP的水解途徑和Aβ的生成。哺乳動物的CUTA可能參與銅的調控，而金屬離子銅在AD的發(fā)病過程中也起著重要作用。因此，對于CUTA的功能研究，將有助于揭示AD的致病機理。
　　本研究

3、中，我們應用TALEN技術構建了Cuta基因敲除小鼠。該小鼠缺失8個蛋白編碼堿基，導致移碼突變。我們建立了應用非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定Cuta基因敲除小鼠的方法。進一步實驗發(fā)現(xiàn)純合的Cuta基因敲除小鼠可以存活，而且其出生率符合孟德爾遺傳定律，性別比例平衡，并且體重無明顯改變。我們對三月齡Cuta基因敲除小鼠與認知記憶和情緒相關的行為學進行了研究，包括曠場實驗、Y迷宮、高架十字迷宮、強迫游泳等，但沒有發(fā)現(xiàn)Cuta基因敲除對小鼠行為有