Hypb基因敲除小鼠胚胎干細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組研究.pdf

1、Hypb是我們實(shí)驗(yàn)室從 CD34+造血干/祖細(xì)胞 cDNA文庫中克隆到的一個(gè)含有SET結(jié)構(gòu)域的基因。我們實(shí)驗(yàn)室先前的工作已經(jīng)證實(shí)它的 SET結(jié)構(gòu)域具有組蛋白H3K36特異性甲基轉(zhuǎn)移酶活性并可以催化自身甲基化，它還含有一個(gè)新的轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域，能與磷酸化的RNA聚合酶II發(fā)生特異的相互作用。隨后，通過基因敲除小鼠模型的建立及表型分析，Hypb又被證明是小鼠胚胎和卵黃囊血管發(fā)育必需的基因，且特異性催化 H3K36me3。為了進(jìn)一步明確 Hyp

2、b基因的生物學(xué)功能,我們建立了Hypb基因敲除的小鼠胚胎干細(xì)胞，以此為模型，研究Hypb對ES細(xì)胞自我更新和定向分化功能的影響。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示Hypb的缺如對ES細(xì)胞自我更新無顯著影響，嚴(yán)重干擾了ES細(xì)胞的內(nèi)胚層定向分化。同時(shí)從轉(zhuǎn)錄組學(xué)層次上，我們發(fā)現(xiàn)HYPB不僅調(diào)節(jié)內(nèi)胚層相關(guān)基因表達(dá)，同時(shí)可以調(diào)節(jié)多個(gè)EMT相關(guān)基因表達(dá)，這提示HYPB可能通過EMT調(diào)控ES定向內(nèi)胚層的分化。除此之外細(xì)胞骨架相關(guān)基因、wnt信號途徑相關(guān)基因的表達(dá)在H